现代生物技术要点整理.doc

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1、1.什么是生物技术,它包括哪些基本的内容?它对人类社会将产生怎样的影响?是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础学科的科学原理,采用先进的工程技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。新兴的、综合性学科。2.谈谈你对未来生物技术发展的前景?1.基因工程研究的理论依据是什么?基因工程的主要理论依据Ø不同基因具有相同的遗传物质(DNA/RNA)Ø基因是可以从DNA上切割下来的Ø基因是可以转移的Ø多肽与基因之间存在对应关系Ø遗传密码是通用的(绝少数除外)Ø可以通过DNA复制把遗传信息传递给下一代2.简述基因工程研究的基本技术

2、路线。9.如何采用PCR技术从生物材料中分离出目的基因?12.筛选克隆子有哪些方法?根据载体标记基因筛选转化子Ø根据载体抗菌素抗性基因筛选转化子Ø根据载体除草剂抗性基因筛选转化子Ø根据LacZ´基因互补显色筛选转化子Ø根据生长调节剂非依赖型筛选转化子Ø根据核苷酸合成代谢相关酶基因缺失互补筛选转化子根据报告基因筛选转化子Øβ-葡萄糖酸苷酶基因(gus)Ø萤火虫荧光素酶基因(luc)Ø绿色荧光蛋白基因(gfp)根据形成噬菌斑筛选转化子如何从一片嫩叶经组织培养培育出众多的完整植株?取样灭菌培养传代收获除菌取样什么叫植物原生质体?如何进行植物原生质体的融合?原生质体(pr

3、otoplast):去除全部细胞壁的细胞可以采取哪些途径脱去植物体内的病毒?如何检测植株中是否还有病毒?n物理方法:温度(高温)n化学方法:孔雀绿等(难)n生物学方法:芽尖、根尖综合脱毒方法n如何用体细胞克隆出一只哺乳动物?克隆动物有什么积极意义?开展干细胞研究对人类有何积极的意义?1.酶有何特性?何谓酶工程?2.为什么要进行酶的修饰,酶的蛋白质工程是如何进行的?制备修饰酶的目的提高酶活力改进酶的稳定性允许酶在一个变化的环境中起作用改变最适pH值或最适温度改变酶的特异性使它能催化不同的底物改变催化反应类型提高催化过程的反应效率酶蛋白质工程的策略l分子裁减l定点突变

4、l对随机诱变的基因库进行定向的筛选和选择l杂交酶(hybridenzyme)——利用高度同源的酶之间的杂交——创造具有新活性的杂交酶3.酶固定化方法有哪些,各有何优缺点?l物理吸附法:是制备固定化酶最早采用的方法,它是以固体表面物理吸附为依据,使酶与水不溶性载体相接触而达到酶吸附的目的。l离子结合法:该法是通过离子效应,将酶分子固定到含有离子交换基团的固相载体上。l螯合法:这是一种比较吸引人的技术,它主要是利用螯合作用将酶直接螯合到表面含过渡金属化合物的载体上,具有较高的操作稳定性。l共价结合法:共价结合法是通过酶分子上的官能团,与载体表面上的反应基团发生化学反应

5、形成共价键的一种固定化方法,是研究得最多的固定化方法之一。共价交联法共价交联法是通过双功能或多功能试剂,在酶分子间或酶分子和载体间形成共价键的连接方法。包埋法将酶包埋在高聚物凝胶网格中或高分子半透膜内的固定方法。前者又称为凝胶包埋法,后者则称为微囊法。简单描述反向生物学的途径。什么是蛋白质组学?针对有关基因或转录组数据库的生物体或组织/细胞,建立其蛋白质组或亚蛋白质组及其蛋白质组连锁群,即组成性蛋白质组学研究。2.基因工程抗虫棉已大面积应用于生产,同时也造成食棉昆虫的耐食性,如何看待这个问题?并提出解决问题的途径。5.动物转基因常用的外源基因导入方法有哪些?各有何

6、优缺点?Ø显微注射法原核期胚胎的显微注射Ø病毒载体法反转录病毒载体感染Ø脂质体介导法脂质体人工膜包裹DNAØ精子介导法成熟精子携带外源DNA入卵Ø胚胎干细胞法全能性干细胞携带外源基因导入胚胎Ø原始生殖细胞法PGC携带外源基因导入胚胎8.畜禽基因工程疫苗有哪些类型?Ø基因工程亚单位苗Ø基因工程活载体苗Ø合成肽苗Ø基因缺失疫苗Ø基因疫苗9.何谓动物生物反应器?其应用前景如何?转基因动物可以像天然原料加工厂,只要投入饲料,就可以得到人类所需要的药用蛋白。11.干细胞技术在动物生产上有何应用前景?l生产转基因的动物l生产克隆动物l研究细胞分化l发育的基因调控研究什么是单细

7、胞蛋白?简述它的几种来源。1.食品检测中生物技术的应用有哪些?转基因食品的PCR检测聚合酶链反应(PCR)技术应用于转基因食品的检测,其敏感、快速、简便的特点是其他检测技术所无法比拟的。转基因食品的ELISA检测转基因食品也可以通过转基因的表达产物——蛋白质进行检测,ELISA方法是检测转基因作物中的重组蛋白产物的常用方法。转基因食品的生物芯片检测基因芯片具有高通量且能并行检测的优点,仅靠一个实验就能筛选出大量的各种转基因食品,被认为是最具潜力的检测手段之一。2.你对转基因食品有什么看法?3.谈谈现代生物技术在食品工业上的应用和发展趋势。利用生物技术制造一种有利于

8、食品保质的

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