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1、光合细菌的分离培养与应用初探摘要光合细菌在无一氛条件下能分解利川氛、亚峭酸、硫化氮等有害物质，使养疽水休净化，同时能降低水质底质的生化耗氛号，从而间接提高溶解氧;光合细菌还可以门于欲虾经贝及禽言的养痊,对农作物与人体保健的应用亦有广阔的开发前景。关健词光合细菌，分离，培养，应丿IJ.光合细菌（P三B）是一种f贻以光作为能源，以C02或有机物作为碳源而进行生长繁殖的微生物•它能利用氨、亚硝峻和琉化氢等有害物质，故在有机质丰富的水体屮可大量繁殖，使污水的BOD下降,在净化水质屮起到了独特的作用.PSB菌体又是一种含蛋白质（滩%）、脂肪（8%）、大
2、量胡萝卜索、B族维生素和辅酶Q及活性促生长抗病因了的特殊细菌.PSB的作川已引起水产养殖界和坏境保护界的重视.PSB亦可作为鱼虾贝类和禽畜的饵（饲）料，对水稻、蔬菜均有增产作用.我们于1993年2月开始对PSB进行分离培养，并在生产上作应用试验，现将初步结果报道如下.1分离与培养1.1材料的采集分离材料采集于宁徳市某豆腐作坊灼排水沟，附着于石头上呈橙黄色或乳白色的沉积物。1.2分离培养基的配制KZHpo'0.69KHZp0;0.59（NH'）:50'1.09Mgso'0.29NaClO.29Na:S:0:0.19NaAeo.5~1.09pII
3、6.7酵母膏0.19CaC工20.29蒸馅水loOOmlS磅蒸压灭菌20分钟lo3分离方法称取沉积物19,加无菌水5ml充分振荡打散，制成悬浊菌液，然后悬浊菌液与液体培养按1:5比例装入40x18omm的大试管屮，在液面上加一层火菌的液体石蜡形成厌氧，置温度28飞00C,光照强度为800oLox进行厌氧培养，三天后培养液明显呈深红色.尔后，以培养液进行琼脂平扳划线分离、纯化,平扳培养基成份如下NH'C11.09工交。HPO40.59MgCI:0.29NaCI2.09酵母膏0.19琼月旨1主一：・09水”01川劫戈份济解后，以1洲旁压力灭菌20
4、分钟,然后无菌操作，加入（1）经过滤灭菌的收稿「J期:飞394年1月1994夕卜第6游第1户1阮少江光合务U菌的分离培养与应用初探3—！NaHCO35.o/6oml水；（2）沁ml经过滤灭菌的乙醇或戊酹或4%丙氨酸，用过滤灭菌的o.1NHOP0'调pH至7.0,趁热进行倒平板，待平板凝間后，在平板表面进行划线，然后在培养基表面用火菌液体石蜡封血，培养条件同上，三天后出现红色小菌落,六天'后单菌落生长良好，挑取单菌落重复分离，肓至得到纯单菌株•笔者共获得两株.1.4菌株特征1'菌株特征菌体呈短杆状至球形,大小为0.5-1.2x2—2.5卜叫多见
5、其特殊的“Z”形排列的链状，琼脂平板菌落圆形，有•径。•3一1mm,表面微凸，呈绛红色，不透明.菌液暴霜空气生长时，培养液由暗红色到紫红色•经鉴定为英膜红假单胞菌（Rhodops"::domonasCapsujata（MolisCh）VanNiell994）.2'菌株特征菌体杆状，两端钝圆，偶见稍弯曲，大小为0.6-0.9x1.3-2.8件m,革兰氏｝卿比,繁殖时，芽生，可见到呈哑铃状;琼脂平板厌氧光照2旷300C培养六天，菌落圆形，边缘整齐，表血凸而状，不透明，呈深红色至暗红色，经鉴定为沼泽红假单胞菌（R注。loPseudomonKisPa
6、lustris（MolisCh）VanNiel1994）.1.5实验室二级培养配制分离培养基分装于500ml锥形瓶,8磅灭菌20分钟,将培养4•飞天生长良好的斜面菌种的菌落刮至事先准备好的培养基（或无菌水）的试管屮，充分振荡，把菌体打散，然麻接到锥形瓶屮，使培养荃呈微红色，再加足培养基至满瓶，用數料薄膜封口，橡皮筋扎紧，使Z成无氧状态，培养条件同上.经培养3~4天后，培养液呈暗红色或紫红色，菌体含量可达1.5火10'个/ml.L6扩大培养（批量生产培养）用暴晒两天不灭菌的白来水配制墙养辰,分装于透明大删料袋（透光度强），每袋10kg,接入二级
7、菌种，接种量与培养液的体积按1:5的比例，排尽袋屮的空气用橡皮筋扎紧袋口，用餌光灯提供光源，光照强度为lOOooLux,经常摇动培养液，防止沉淀,经三沢培养，培养液呈暗红色或紫红色,菌体含量可达1.0xlo7^2.0x10?个/。1.可供扩大培养用的培养基有培养基1（NH;）:50T.09MgS0'o.ZgN二HCO。5.09KZHPO'0.59NaCTO.29蛋自陈1.59酵母膏0.19自来水I000mlpH7.T7.28磅灭菌20分钟培养基ZM;50、0.5:KHZ尸0;0.魄NaAc2.魄酵母膏1.帷自来水lOOOmlpHS.058访灭
8、菌20分钟2应用试验今年七月初，笔者在宁徳市漳湾镇、七祁镇和扛浦具！'璧乡等地的长毛对虾池屮试验•试验选择在小潮水时进行，按sk”亩的光合细菌量均匀拌入泥砂屮，泼撒
