血管紧张素Ⅱ对大鼠血管平滑肌细胞T型钙通道及其信号转导通路的影响.pdf

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1、中国医科大学学报第43卷第9期2014年9月·802·JournalofChinaMedicalUniversityVo1．43No．9Sep2014·论著·血管紧张素II对大鼠血管平滑肌细胞T型钙通道及其信号转导通路的影响王菁卓，姚旭哲，李斌，潘一龙，李晓东(中国医科大学附属盛京医院心内科，沈阳110004)摘要目的研究血管紧张素Ⅱ(AnglI)对血管平滑肌细胞Cav3．1表达的影响及其作用机制。方法酶消化法原代培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞，应用第5代传代细胞，实验随机分为7组：对照组(不加任何药物)、AngII组[加入AngII(0．1mol，L)培养24h]、AngⅡ+氯沙

2、坦钾组[加入氯沙坦钾(1p,mol／L)zt&养1h，再加入AngⅡ(0．1mo1／L)共同培养24h]、AngII+PD98059组[加入PD98059(10mol／L)预刺激1h，再加入AngII(0．1p~mol／L)共同培养24h]、PD98059组[加入PD98059(10p~mol／L)培养1h]、AngII+氯沙坦钾+PD98059组[先加入氯沙坦钾(1Ixmol／L)，PD98059(10Ixmol／L)养1h，再加入AngII(0．1Ixm01／L)共同培养24h]、氯沙坦钾组[加入氯沙坦钾(1p~mol／L)培养4h]。RT—PCR、Westernblot方法

3、测定各组T型钙通道的表达。结果PCR结果显示：与对照组(1．000±0．315)比较，AngII组Car3．1表达量(17．930~0．954)明显增加(P<0．01)；PD98059组、氯沙坦钾组Cav3．1表达量为0．928~0．262、0．978~0．292，与对照组比较差异无统计学意义(P>0．05)；AngⅡ+氯沙坦钾组、AnglI+PD98059组、AngⅡ+氯沙坦钾+PD98059组的Cav3．1表达量分别为0．125~0．007、0．066~0．015、0．109~0．018，明显低于AngⅡ组(P<0．01)。Westernblot结果显示：与对照组比较，Ang

4、Ⅱ+氯沙坦钾组、AngⅡ+PD98059组及AngⅡ+氯沙坦钾+PD98059组Cav3．1蛋白表达明显降低(P<0．05)；而PD98059组及氯沙坦钾组Cav3．1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0．05)。结论Ang1通过Ras／PKC~／MEK／ERK1／2路径增加血管平滑肌细胞Cav3．1的表达关键词T型钙通道；Cav3．1；血管平滑肌细胞；细胞增殖；血管紧张素Ⅱ中图分类号R329．28文献标志码A文章编号0258—4646(2014)09—0802—04网络出版地址http：／／www．cnki．net／kcms／detail／21．1227．R．20140

5、924．1418．013．htmlInfluenceofAngⅡOilT-typeCalciumChannelsandSigmaTransductionPathwayinRatVascularSmoothMuscleCellsWANGJing·zhuo，YAOXu—zhe，LIBin，PANYi—long，LIXiao—dong(DepartmentofCardiology，Sheng~ingHospital，ChinaMedicalUniversity，Shenyang110004，China)AbstractObjectiveToinvestigatetheefectsorA

6、ngIIonT—typecalciumchannelsinratvascularSnloothmusclecells．MethodsPfimmycul—tureofrataorticvascularsmoothmusclecellswasestablishedbyenzymedigestionmethod．andthefifthgenerationcellswereusedinthestudy．Cellswererandomlydividedinto7groups：~contmlgroup：withoutanydrugs；@AngⅡgroup：Angl10．1I~mol／Lfor

7、24hours；@AnglI+losartanPO—tassiumgroup：losartanpotassium1p~mol／Lfor1hour，thenaddAngⅡ0．1txmol／Landculturesforanother24hours；④AnglI+PD98059group：adds10~Unlo1]LPD98059andstimulusforlhour．thenadds0．1p~mol／LAngIIandculturesfor24hourstogether；⑧PD98