氯仿法提取蜡梅花被片表层蜡质的研究.pdf

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1、·园林花卉·植物北方园艺2013(23)：96～99氯仿法提取蜡梅花被片表层蜡质的研究方子义，赵世萍，宋晓惜，王倩丽，赵凯歌，陈龙清(华中农业大学，园艺植物生物学教育部重点实验室，湖北武汉430070)摘要：以山蜡梅、“金蓓”素心蜡梅及“扬州黄”素心蜡梅为试材，使用扫描电子显微镜观察，研究了氯仿加热不同时间处理对蜡梅盛开期花被片蜡质提取效果的影响。结果表明：山蜡梅花被片蜡质提取最适条件为氯仿60℃处理30S，表层蜡质含量约为1034．33btg／cE；素心蜡梅“金蓓”和“扬州黄”花被片蜡质提取最适条件均为氯仿60℃处理20S，“金蓓”素心蜡梅花被片表

2、层蜡质含量约为651．33t~g／cm2，“扬州黄”素心蜡梅花被片表层蜡质含量约为1057．33t,g／cm2。关键词：氯仿法；蜡梅；花被片；蜡质含量中图分类号：Q949．747．2文献标识码：A文章编号：1001-0009(2013)23一O096一O4植物表层蜡质对植物起到关键的保护作用，它是植3月，远在展叶前开放。蜡梅素有“三耐”(耐寒、耐旱、耐物抵抗外界胁迫的最外层保护结构，可减少非气孔性水剪)和“三不”(冻不死、旱不死、砍不死)之称，具很强的抗分散失、抵御病虫害的侵入，还可有效减少紫外辐射、冷逆性。与蜡梅同属的山蜡梅(Chimonanthu

3、snitensOliv．)冻害等环境伤害I1，因而植物表层蜡质含量是衡量植为常绿灌木，花期为10～12月，也有较强抗寒能力。一物抗逆性的重要指标。般认为，植物体中应对外界胁迫能力最差、外界逆境抗植物表层蜡质的主要成分有脂肪族化合物、环状化性最弱的为花器官，但是蜡梅花盛开于严寒时期，因而合物以及甾醇类化合物等口]。不同物种之间蜡质的含推测二者花被片较强的抗逆能力很可能与其表层富含量及成分差异较大，从而提取植物表层蜡质的方法也各蜡质有关。鉴于观赏植物花器官鲜见相关文献，因此该不相同。植物表皮蜡质最常用的提取方法是采用氯仿、研究采用不同时间处理对比氯仿加热

4、法提取花被片蜡正己烷等有机溶剂进行浸泡、提取，氯仿提取蜡质效果质，优化蜡梅、山蜡梅花被片蜡质提取方法，以期为今后优于正己烷L4]。但细胞内脂溶物质也同时容易被有机蜡梅花被片及其它植物花被片的蜡质研究提供依据。溶剂所提取出，因此在提取植物表层蜡质时应控制好浸1材料与方法泡时间，一般为几秒至1min左右(]。前人研究表明，1．1试验材料常温下氯仿或正己烷浸泡30S拟南芥，即可去除叶片上山蜡梅盛开期花被片于2011年11月30日采自华的表皮蜡质

5、9]，O’toole等口。。将水稻叶片浸泡在氯仿中农业大学园林树木学标本园；素心蜡梅的2个品种中6S，提取到的蜡

6、质含量仅有0．1～1．41l上g／cm~。周“金蓓”素心蜡梅(Chimonanthuspraecox‘Jinbei’)和“扬小云等口通过常温法、加热法和常温加热结合法分别用州黄”素心蜡梅(Chimonanthuspraecox‘Yangzhou—氯仿、正己烷处理水稻叶片对比得出，氯仿加热法处理huang’)盛开期花被片于2011年12月29日采自华中农去除蜡质效果最佳，以此为基础设计该试验。业大学校园。蜡梅(ChimoTmnthuspraecox(L．)Link)另名黄梅，1．2试验方法是中国传统名花之一，为我国所特产，花期12月至翌年根据周小云等稻

7、叶表皮蜡质提取方法处理蜡梅花被片，并做如下改进。处理前将近0．2g的样品进行第一作者简介：方子义(1987一)，男，硕士研究生，研究方向为园林精确称取记录，用画图法计算其表面积口。将植物材料植物种植资源创新及利用。E-mail：fangziyi163@126．coin．分别置于30mI60℃氯仿中，lO、2O、30、40、5O、60S不同责任作者：赵凯歌(1975一)，女，博士，副教授，中国花协荷花分会副时间梯度处理样品，每个处理设3次重复，待提取液自秘书长，现主要从事我国特有园林植物和新优园林植物的种质资然挥发后精确称重。氯仿加热处理前后重量之差为

8、蜡源调查收集及分子与形态评价和离体保存与利用分子育种和常规育种手段进行园林植物资源的种质创新等工作。E—mail：zhao—质质量，蜡质含量(tlg／cm2)一蜡质质量(／~g)／表面积kaige@mail．hzau．edu．cn．(cH12)。通过JSM一639O／LV扫描电子显微镜观察氯仿基金项目：国家自然科学基金资助项目(31272207；30800762)。加热处理后花被片表层结构变化。收稿日期：2013—09—10材料采集后立即按上述方法进行处理，处理后放于96北方园艺2013(23)：96～99植物·园林花卉·2．5戊二醛固定液固定通过J

9、SM-6390／LV扫描电子显心蜡梅的2个品种同时表现出此类现象，即在处理20S微镜对盛开期花被片表层蜡质进