山楂叶总黄酮对血管性痴呆大鼠海马谷氨酸和NMDA受体表达的影响.pdf

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1、广东医学2014年2月第35卷第3期GuangdongMedicalJournalFeb．2014，Vo1．35，No．3·353·山楂叶总黄酮对血管性痴呆大鼠海马谷氨酸和NMDA受体表达的影响冰赵蕾，吴晓光，杜娈英，刘胜，李蒙蒙，张天鸽，Y----7-~承德医学院病原生物学教研室，基础医学研究所(河北承德067000)【摘要】目的探讨山楂叶总黄酮对血管性痴呆大鼠海马谷氨酸含量及其NMDA受体表达的影响。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组及山楂叶总黄酮I、Ⅱ、Ⅲ组，每组12只，永久性结扎双侧颈总动脉法制备血管性痴呆大鼠模型，尼莫地平组及

2、山楂叶总黄酮各组给予相应剂量药物灌胃，模型组及假手术组给予等量生理盐水，采用避暗实验观察大鼠学习记忆能力，电镜观察海马神经元超微结构，免疫组化法检测海马组织谷氨酸含量及其NMDA受体表达。结果与模型组比较，山楂叶总黄酮70、140、280mg／kg剂量依赖性地增加大鼠逃避潜伏期(P<0．05，P<0．01)，减少错误次数(P<0．05，P<0．01)，提高选择正确率，显著改善大鼠学习记忆障碍；谷氨酸及其NMDA受体免疫阳性细胞积分光密度显著增加(P<0．05，P<0．01)。结论山楂叶总黄酮能显著改善大鼠学习记忆障碍，机制可能与其有效调节海马内谷氨酸、N

3、MDA受体的表达有关。【关键词】血管性痴呆；山楂叶总黄酮；海马；谷氨酸；NMDA受体血管性痴呆(VD)是以脑组织慢性缺血缺氧而导和药物研究所)。致认知功能障碍为特征的一种疾病。在我国，VD占老1．3VD动物模型制备及给药参照NI等两血管年痴呆的65％，具有很高的致死率和致残率，严重威阻断法制备慢性脑灌注不足的动物模型。大鼠术前胁着中老年人的生活质量。目前，VD具体发病机制12h禁食不禁水。40mg／kg戊巴比妥钠麻醉，颈正中尚不明确，治疗方法多以改善症状为主，缺乏有效的治矢状切口，钝性游离出双侧颈总动脉，双重丝线结扎疗药物。因此，探讨VD的发病机制，寻找

4、疗效确切的后，剪断双侧颈总动脉，缝合皮肤。假手术组同法分离防治药物已经成为神经学研究的热点。已有研究表明双侧颈总动脉，不结扎，不剪断颈总动脉。术后第30谷氨酸的合成及NMDA受体表达异常与VD密切相天，山楂叶总黄酮I、Ⅱ、Ⅲ组分别给予山楂叶总黄酮关j。山楂叶总黄酮(totalflavoneofhawthornleaf)是70、140、280mg／kg灌胃，尼莫地平组给予尼莫地平6．5中药山楂叶的提取物，具有抗氧化，抑制细胞凋亡，mg／kg，假手术组及模型组给予等量生理盐水灌胃，1减轻炎症反应的作用。2012年4月至2013年9月，次／d，连续30d。本研

5、究通过双侧颈总动脉结扎法建立慢性低灌注大鼠1．4动物卒中指数及神经学评分手术后24h，分别VD模型，观察山楂叶总黄酮对VD大鼠学习记忆能力对各组大鼠进行卒中指数及神经病学症状评定。此评和海马组织谷氨酸含量、NMDA受体表达的影响，为临定是保证模型大鼠学习记忆障碍训练正常进行的基本床应用山楂叶总黄酮防治慢性脑缺血导致的VD提供条件，若有明显运动障碍的则影响行为学检测结果，即实验支撑和理论依据。剔除。1材料与方法1．4．1卒中指数评定标准评分标准：毛发竖起或脏乱1分，运动缓慢迟钝或减少1分，触耳感觉迟钝31．1实验动物及分组选取SPF级雄性SD大鼠，9～分，

6、头翘起3分，眼睁开不闭合3分，睑下垂1分，后肢10月龄，体质量230～250g，72只，购于北京华阜康生向后外侧伸展呈“八”字3分，转圈3分，惊厥或抽搐3物科技股份有限公司，合格证号：sexk(京)2009—分，四肢无力6分。总得分0～2分为无症状组；3～9分0007。大鼠按体重采用随机数字表法随机分为假手术为中间组，可能有损伤；≥10分为症状明显，有损伤。组、模型组、尼莫地平组及山楂叶总黄酮I、Ⅱ、Ⅲ组，1．4．2神经病学症状评分标准评分标准：自主性每组l2只。探究0分，外力刺激时走动1分，不能走动2分；步态1．2药品及试剂、仪器山楂叶总黄酮由山西振东

7、泰正常0分，共济失调1分，爬行2分，无步态3分；自主盛制药有限公司提供，批号：1209122。PKC免疫组化进食0分，不进食1分，饮水0分，不饮水t分；对痛刺试剂盒(武汉博士德生物科技有限公司)，戊巴比妥钠激反应：移动或走动0分，头或躯干动1分，肢体回缩(德国进口分装)。自主活动箱(中国医学科学院协和或无反应2分。总得分0分正常，1～3分为轻度损伤，药物研究所)。避暗箱分析系统(中国医学科学院协4～6分中度损伤，7～l0分为严重损伤。河北省医学科学研究重点项目(编号：20120160)1．5大鼠学习记忆评价(1)避暗实验：避暗箱是由△通信作者。E—mai

8、l：ewxg@qq．eom一个明室和暗室组成的装置，明室和暗室的连接处有·354