免疫组化技术的原理及方法.pdf

《免疫组化技术的原理及方法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、免疫组织化学技术免疫组织化学技术的原理及方法的原理及方法北京友谊医院北京友谊医院病病理科理科黄受方黄受方生物秀-专心做生物www.bbioo.com免免疫疫组织化学技组织化学技术术的原理及其的原理及其方法方法一.基本知识二.基本原理-专心做生物三.方法生物秀www.bbioo.com四.结果的判断及异常着色原因分析和对策生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区bbs.bbioo.com生物秀-专心做生物www.bbioo.com一、免疫组化技术的基本知识一、免疫组化技术的基本知识专心做生物-生物秀www.bbioo.com生物秀论坛-学术交流、资源共享

2、与互助社区bbs.bbioo.com生物秀-专心做生物www.bbioo.com一、一、免免疫疫组化组化技术技术的的基基本知识本知识n免疫组化的基本概念利用抗原-抗体特异性结合原理检测抗原或抗体一般是用抗体检测抗原专心做生物n抗原-两个主要属性：免疫原性及特异反应性，蛋白质具有抗原性生物秀www.bbioo.comn抗体与抗原能特异性结合—生物学结合是免疫球蛋白Ig生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区bbs.bbioo.com生物秀-专心做生物www.bbioo.com免疫球蛋白的免疫球蛋白的化化学结构及其模学结构及其模式图式图免疫球蛋白根据重链结

3、构命名IgG(γ),IgA(α)，IgD(δ),IgE(ε),IgM(μ)-专心做生物五种免疫球蛋白只有两种类型的轻连，即：生物秀www.bbiooKa.ppcoma(κ)和Lambda(λ)每个抗体分子的轻链必须相同；某一单独的抗体分子决不可能既有κ链又有λ链。这一点在免疫组化的淋巴瘤诊断中十分重要。生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区bbs.bbioo.com生物秀-专心做生物www.bbioo.com免疫免疫球球蛋蛋白的白的化学化学结结构构及其及其模式图模式图nFc(Fragmentcrystalline)Fc是免疫球蛋白的羧基端，意为结晶片

4、段，因其纯化时呈结晶状态而名之，该片段与抗原特专心做生物异性有关-nFab(Fragmentantigen生物秀Fabwww.bbioobin.gcdoming)该端是抗体与抗原特异性结合Ag的部位，每分子Ig能结合2个抗原分子生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区bbs.bbioo.com生物秀-专心做生物www.bbioo.com多多克克隆抗体与单隆抗体与单克克隆抗体及其隆抗体及其产生产生多克隆抗体n多克隆抗体：多株B细胞针对多个抗原决定簇产生的抗体专心做生物-单克隆抗体生物秀www.bbnioo单克隆抗体：针对某.com一抗原决定簇，由单株淋巴

5、细胞（克隆）所产生的抗体生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区bbs.bbioo.com生物秀-专心做生物www.bbioo.com多克多克隆隆抗抗体与体与单克单克隆隆抗抗体及体及其产生其产生n多克隆抗体的产生n以纯化的抗原免疫动物而获得，实际上是针对多个抗原决定簇的多个抗体组成，检测范围广。在病理诊断中，有利划归肿瘤专心做生物的基本类型。-n常用的多克隆抗体一般在兔身上产生，国外产品目录上常以R生物秀aH（RabbitagainstHuman）表之。www.bbioo.comn多克隆抗体亦可产生于羊、猪、豚、鼠等。弄清一抗多克隆抗体的动物来源种类，

6、对后继抗体的选用至关重要。生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区bbs.bbioo.com生物秀-专心做生物www.bbioo.com多克多克隆隆抗抗体与体与单克单克隆隆抗抗体及体及其产生其产生单克隆抗体的产生应用细胞融合的杂交瘤技术（Hybridization），以针对单专心做生物一抗原决定簇的小鼠与小鼠骨-髓瘤细胞（肿瘤性B细胞）融合形成杂交瘤，其特点是既能产生物秀www.bbioo生.c特异om性抗体，又能在体外无限地增殖。将瘤细胞在体外培养或注入小鼠腹腔内而获单克隆抗体，由此产生的小鼠抗人（抗原）的抗体常以MaH表示，现在亦有兔的单克隆抗体生

7、物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区bbs.bbioo.com生物秀-专心做生物www.bbioo.com免疫小鼠Mouse专心做生物-生物秀www.bbioo.com生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区bbs.bbioo.com生物秀-专心做生物www.bbioo.comn抗原的抗原的制制备：备：n传统用蛋白提纯专心做生物n近来可应用分子生-物学技术：已知抗原的基因结构，用其合成多肽，作为抗原，如ER、PR抗生物秀原的制备www.bbioo.comn现有兔的单抗生物秀论坛-学术交流、资源共享与互助社区bbs.bbioo.com生物秀-专心做生物

8、www.bbioo.comn多多克隆克隆抗体抗体和和多多克克隆抗隆抗体的体的选选用用n单克隆抗