掌叶秋海棠组培快繁体系的建立.pdf

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1、中国园艺文摘2014年第6期掌叶秋海棠组培快繁体系的建立王辉(华北油田公司华盛综合服务处，河北任丘062550)摘要：掌叶秋海棠(BegoniahemsleyanaHook．f．)作为一种野生的花卉资源，具有巨大的应用潜力。研究掌叶秋海棠的组织培养体系：以芽作为外植体，采用常规消毒(自来水冲洗50rain、70％酒精处理50s、0．1％升汞处理8min)能够获得较好的消毒效果。以MS+6-BA1．0mg／L+NAA0．1mg／L作为分化培养基，分化率可达到70．00％。适宜的生根培养基为1／zMS+N^^0．1mg／L，生根

2、率达到100％。关键词：掌叶秋海棠；分化；组织培养掌叶秋海棠(BhemsleyanaHook．f．)，系秋海棠科秋芽接种于培养基上，20d后比较NAA不同浓度的生根效果。海棠属多年生中型草本植物，属于我国第2批待评保护级形成根系后开瓶炼苗2d，洗去根部附着的培养基，移栽植物。主要分布在云南(屏边、金平、马关、蒙自)、广西到装有灭菌沙土的塑料钵中，喷洒500倍甲基托布津，覆(那坡、德保)、四川(巴县)，生于海拔1000～1300m盖薄膜保湿7d。去膜，见植株开始生长后移栽。山坡阴处潮湿地带、疏林中、山谷林内石壁上和水边一。2结

3、果与分析另外，在重庆缙云山等地也有零散分布。由于其叶片掌状2．1不同外植体消毒效果的比较全裂为六“小叶”，叶柄及背部叶脉均为紫红色，花洁白，从表1可以看出，以叶柄、叶片以及茎段作为外植体因此，具有较高的观赏价值。在野生状态下，掌叶秋海棠进行常规消毒后污染率高、成活率较低。这主要是因为：(1)的结实率低，种子萌发率更低，主要以无性繁殖为主，大茎段、叶柄有大量表皮毛，为材料的消毒带来困难。(2)内大降低了其繁殖效率。试验研究掌叶秋海棠组织培养体系，生菌的存在。切取外植体的部分植株体内带有细菌，接种旨在为以后的保护以及应用打下基础

4、。后污染表现为从切口处溢出菌脓。(3)叶片薄(膜质)，在1材料与方法消毒过程中容易被杀死。相比之下，采用未萌发的芽作外1．1试验材料植体的消毒效果最佳，并能够取得较高的成活率。植株采自重庆缙云附近。表1不同外植体消毒效果1．2试验方法1．2．1无菌体系的建立分别选用叶柄、叶片，茎段，芽作为外植体。采用常规消毒，即自来水冲洗30min、70％酒精处理30S、0．1％升汞处理8min。叶柄、茎段剪成lcm，叶片剪成0．5cm的小块，芽采用剥芽法剥得，然后接种于再生培养基上。2周后观察统计结果，比较不同外植体的消毒效果及成活率。1

5、．2．2离体分化培养基的筛选参考其他关于秋海棠的组织培养研究【3一，设计以MS为基本培养基，培养基中分别附加6-BA0、0．5、1．0、2．0mg／L,NAA0、0．1、0．2、2．2分化培养基筛选结果0．5mg／L。采用L。()的正交设计进行最适激素配比的接种后5d开始出现愈伤并逐渐分化，20d后再生植筛选。共设计l6组处理组合，外植体选用上一步获得的无株可以看到明显的叶丛。40d的统计结果(见表2)表明，菌叶片，剪切大小同上。每个处理接种30个外植体。所有以叶片作为外植体在供试的6一BA0、0．5，1．0、2．0mg／L

6、培养基皆以6．0g／L的卡拉胶固化，添加蔗糖3％。pH值与NAA0、0．1、0．2、0．5mg／L不同配比的MS培养基5．8，培养温度为(25土2)℃。光照1800～2500b(，每上均能分化出芽。但是不同的激素配比导致的分化率不同，天光照12～14h。接种40d后统计分化率。其中以MS附加6-BA1．0mg／L+NAA0．1mg／L的1．2．3生根培养与移栽以1／2MS为基本培养基，添加分化率最高，达到70．00％，且丛生芽数量多(见图1、2)。浓度为0、0．1、0．2、0．5mg／L的NAA。将再生的不定激素浓度过高(6

7、一BA2．0mg／L、NAA0．5mg／L)或过低(6一BA0、0．5mg／L，NAA0mg／L)都不利于再生不定芽。作者简介：王辉(1979一)，男，助理农艺师；主要从事矿区绿化种植、养护等方面的管理工作。-35-CHINESEHORTICULTUREABSTRACTS表2不同激素配比对分化率的影响图2接种30d后再生情况2．3生根培养基的筛选结果表3不同浓度NAA对生根的影响在附加不同浓度NAA的1／2MS培养基上，不定芽7d开始生根，12d后大多数不定芽生根。比较不同浓度的NAA对生根的影响，表3结果表明，NAA在4种

8、浓度下均能生根，其中0．1mg／L与0．2mg／LNAA生根率都达到100％。但是在0．1mg／L浓度时，不定芽生根多，根分支多，且无愈伤产生。0．2mg／L的NAA虽然能够使不定芽生根，生根数多，但是却容易产生愈伤，使移栽难以成活。2．4炼苗与移栽生根培养3周后，把已生根苗从培养室取出并