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时间:2020-06-03
《肿瘤相关巨噬细胞对皮肤恶性黑素瘤细胞A375生物学行为的影响.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华皮肤科杂志2014年9月第47卷第9期Chin.JDermat0LSeptenaber2014.VoI.47.N0.9619·论著·肿瘤相关巨噬细胞对皮肤恶性黑素瘤细胞A375生物学行为的影响殷芳吴飞陈佳章楚光宋宁静【摘要】目的探讨肿瘤相关巨噬细胞对皮肤恶性黑素瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法取对数生长期人单核细胞株U937,采用佛波酯诱导48h后,分为3组,M‘p组(继续用佛波酯诱导48h)、M1组(用25mg/LLPS诱导48h)、M2组(用15g,LIL一4诱导48h)。酶联免疫吸附试验检测各组巨
2、噬细胞上清中IL一12p70和IL一10表达水平。建立巨噬细胞与恶性黑素瘤A375细胞体外共培养体系,分别设单独培养组、Mqo组(A375细胞和M‘p巨噬细胞共培养)、M1组(A375细胞和M1型巨噬细胞共培养)、M2组(A375细胞和M2型巨噬细胞共培养),分别运用噻唑蓝法、Transwell小室法观察不同激活途径的巨噬细胞对A375细胞增殖、侵袭、迁移等生物学行为的影响。结果增殖实验显示,共培养48、72h后M‘p巨噬细胞、M2型巨噬细胞显著促进A375细胞的增殖,M1型巨噬细胞抑制A375细胞的增殖,各
3、处理组间两两比较,差异有统计学意义(均P<0.05),共培养24h后各组间两两比较A375细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05)。侵袭实验显示M2组和Mqo组穿过Transwell膜的A375细胞数量(147.00-1-7.92、113.22±8.15)较单独培养组(84.11±6.07)明显增加(P<0.05),M1组穿膜细胞(56.44±7.55)明显减少(P<0.05)。迁移实验显示M2组和Mqo组穿过Transwell膜的A375细胞数量(198.33±8.22、156.00±8.83)较单独培养
4、组(123.89±7.01)明显增加(均P<0.05),M1组穿膜细胞(97.11±6.75)明显减少(P<0.05)。结论IL一4激活的M2型巨噬细胞对A375细胞的增殖、侵袭和迁移可能起促进作用;脂多糖激活的M1型巨噬细胞对A375细胞的增殖、侵袭和迁移可能起抑制作用。佛波酯诱导的巨噬细胞更倾向于M2型巨噬细胞表型。【关键词】黑色素瘤;细胞系,肿瘤;巨噬细胞;细胞增殖;细胞运动Efectsoftumor-associatedmacrophagesonthebiologicalbehaviorofA375h
5、umanmalignantmelanomaceHsYinFang~WuFei,ChenJia,ZhangChuguang,SongNingiing.*ShanghaiSkinDiseaseHospital,AnhuiMedicalUniversity,Shanghai2DD443.inaCorrespondingauthor:SongNingjing,Email:songnj一10@163.com【Abstract】ObjectiveToevaluatetheeffectsoftumor-associated
6、macrophagesontheproliferation,invasionandmigrationofhumancutaneousmalignantmelanomacells.MethodsCulturedU937humanmonocyticcellsatlogarithmicphasewereclassifiedintothreegroupstobepretreatedwithphorbolesterfor48hoursfollowedby48-houractivationbyphorbolester(M
7、q0polarization),lipopolysaccharide(IJPS)at25mg/L(M1polarization),andinterleukin(IL).4at15g/L(M2polarization)respectively.Then,enzyme.1inkedimmunosorbentassay(ELISA)wasperformedtodeterminethelevelsofIL.12p70andIL.10inthesupernatantoftheseactivatedcells.A375h
8、umanmalignantmelanomacellsweredividedintofourgroupstobeculturedaloneorwithM‘D..M1.andM2.polarizedmacrophagesrespectively.Afteradditionalculturefordifferentdurations(24,48and72hours),methylthiazolyltetr
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