转CecropinB基因柑桔对溃疡病的离体抗性评价.pdf

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1、中国南方果树／SOUTHCHINAFRUITS2014；43(2)：1～4，21·柑桔类果树·转CecropinB基因柑桔对溃疡病的离体抗性评价刘琦琦，邹修平，彭爱红，许兰珍，何永睿，陈善春(1中国农业科学院柑桔研究所／西南大学柑桔研究所／国家柑桔品种改良中心，重庆，400712；2西南大学园艺园林学院)～摘要：为评价转抗茵肽基因CecropinB的锦橙植株对柑桔溃疡病的抗性，分剐用喷雾法和针刺法进行了离体叶接种柑桔溃疡病菌试验，并用Real—timePCR和Southernblot进一步分析了CecropinB在转基因植株中的表达、整合情况。结果显示，与喷雾

2、法相比，针刺接种处理的离体叶片显症时间短，发病率高，便于统计分析。针刺接种6天，大部分转基因植株发病率与非转基因植株无显著差异；其中，PR8、PR11、AAT8和AAT14单株的发病率分别为67．O％、62．9％、68．1％和54．2％，显著低于非转基因植株(96．7％)。对柑桔溃疡病具有抗性的转基因植株(PR8、Pl尺l1、AAT8和AA丁14)的CecropinB基因表达量明显高于对照(非转基因植株)。PR8和AAT14植株中的CecropinB为单拷贝，PRll和AAT8植株中的CecropinB分别为2个拷贝和3个拷贝。转入CecropinB可提高锦橙

3、对柑桔溃疡病的抗性。关键词：转基因柑桔；CecropinB基因；柑桔溃疡病；抗病性；针刺法中图分类号：Q78；S436．661．1文献标识码：A文章编号：1007-1431(2014)02—0001—05InvitroEvaluationofResistancetoCitrusCankerbyTransgenicOrangePlantswithAntibacterialPeptideGeneCecropinBLIUQiqi，ZHOUXiuping，PENGAihong，XULanzhen，HEYongrui，CHENShanchun(1CitrusResear

4、chInstitute。ChineseAcademyofAgriculturalSciences／Nationa1CenterforCitrusVarietyImprovement，Chongqing400712，PRChina~2Collegeoflandscapearchitecture，SouthwestUniversity)Abstract：ResistanceoftransgenicJinchengplantswithCecropinBtocitruscankercausedbyXan—thomonasaxonopodispv．citri(Xac)w

5、asinvestigatedwiththemethodsofinvitroleafinoculation—byneedle-punctureandsprayinoculations．ExpressionofCecropinBgeneintransgenicplantswasanalyzedbyRealtimeq-PCRandSouthernblotting．Theresultsshowedthatcomparedwithsprayinoculation，theneedlepunctureinoculationdemonstratedtheadvantageso

6、ncollectingdataforsta—tisticanalysiswithearlierdevelopmentofthediseasesymptomandhighervalueofincidencerate．After6daysofinoculation，mostoftransgenicplantshadnosignificantdifferenceonincidenceratewithnontransgenicplants．However，theincidenceratesofPR8，PR11，AAT8andAAT14were67．O、62．9、68．

7、1and54．2，respectively，whichweresignificantlylowerthanthoseofnon—transgenicplants(96．7)．TheexpressionofCecropinBgeneinPR8，PRll，AAT8andAAT14plantswasalsohigherthanthatofcontro1．CecropinBgeneinPR8andAAT14wassinglecopy。andinPR11andAAT8plantswastwoandthreecopies．respectively．Aboveevidenc

8、esindicated收稿日期；201