可剪切杂合抗病蛋白基因的构建及转基因柑橘溃疡病抗性评价

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1、靴代码—腿＾＂＂“学号■■００１７６０＾ｓｉｐｙ遂泰Ｖ：普硕士学位论文可剪切杂合抗病蛋白基因的构建及转基因根橘溃疡病抗性评价论文作者：解栋梁指导教师：陈善春研究员邹修平副研究员学科专业：细胞生物学研究方向：细胞遗传提交论文日期１５：２０年５月２０日论文答辩日期：２０１５年５月２８日学位授予单位：西南大学中国？重庆２０、１５年５月二／．■人？－■＞，？？？，“■＞－、＞．？－ｎ：■－

2、■‘．－Ｉ独创性声明学位论文题目：可剪切杂合抗病蛋白基因的构建及转墓因＃橘潘癌病抗性评价本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研宄成果，文中已加了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。学位论文作者签字日期：１：年月日＞１＜３＾学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交

3、论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研宄生院（筹）可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存。、汇编学位论文（保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：Ｗ不倮密，□保密期限至年月止）。学位论文作雜名：签字日期：：年月？＞日签字日期年月３日目录目录ｍｇＩＡｂｓｔｒａｃｔＩｌｌ第１章文献综述１１．１村梧产业概况１１．２批梧常见病害１１．３报梧溃病病简介１

4、１．３．１樹梧馈病病生物学特性１１．３．２相桔馈疡病菌系分型２１．３．３柑梧淸疬病的检测２？１．３．４相梧馈病病防治研宄进展３１．３．５相梧溃荡抗性育种研究进展４１．４抗菌肽及其在植物基因工程中的应用５１．４．１抗菌肽生物活性６１．４．２抗菌肽的分类６１．４．３抗菌肽的作用机制７１．４．４抗菌肽在植物基因工程中的应用７１．５溶菌酶研宄进展８１．５．１溶菌酶的理化性质及生物学特性８１．５．２溶菌酶的分类８１．５．３溶菌酶的

5、应用９１．６融合基因及其在植物基因工程中的应用１０１．６．１融合基因的分类１０１．６．２获得多价转基因植物的方法１１１．７信号肽在植物基因工程中的应用１２第２章引言１５２．１目的与意义１５２．２技术路线１６第３章可剪切连接多肽２Ａ和ＬＰ４在相梧中指导目的蛋白剪切效率分析１７３．１菌株、仪器与试剂１７３．１．１载体与菌株１７３．１．２主要仪器１７ｉ西南大学硕士学位论文３１３．．试剂１７３．１．４溶液１７３．１

6、．５培养基２０３．２实验方法２０３－－－－．２．１融合基因ＧＦＰＬＰ４ＧＵＳ和ＧＦＰ２ＡＧＵＳ的克隆２０？３－－．２．２植物表达载体ＰＢＩ１２１ＧＬＧ和ｐＢＩ１２１ＧＡＧ的构建２７３－－．２．３植物表达载体ＰＢＩ１２１ＧＬＧ和ｐＢＩ１２１ＧＡＧ转化农杆菌２８－－３．２．４农杆菌介导的ＰＢＩ１２１ＧＬＧ和ｐＢＩ１２１ＧＡＧ转化锦橙上胚轴２９３．２．５阳性再生芽的鉴定３０３．２．６ＧＵＳ组织化学染色鉴定转基因植株３０３．２．７蛋白质印记３０

7、３．３结果与分析３２－－－３－．３．１融合基因ＧＦＰＬＰ４ＧＵＳ和ＧＦＰ２ＡＧＵＳ的克隆３２３．３．２杂合蛋白基因ＧＬＧ和ＧＡＧ完整编码框的构建及植物表达载体－－ＢＩ１２１ＧＬＧＩ１２ＧＡＧＰ和ＰＢ１的构建３４３．３．３转基因植株的获得３５３．３．４阳性再生芽的鉴定３６３．３．５转基因ＧＦＰ和ＧＵＳ表达情．３７植株中况分析．．３．３．６Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ３８第４章可剪切融合抗病蛋白基因的构建及转化锦橙的研究４１４．１菌株、仪器与

8、试剂４１４．１．１载体、菌株４１４．１．２主要仪器４１４．１．３试剂４１４．１．４常用溶液４１４．１．５常用培养基４１４．２实验方法４１４．２．１抗病融合蛋白基因的设计４１４－－－－．２．２植物表达载体ｐ３５Ｓ：ＣＢ２ＡＨＬ、ｐ３５Ｓ：ＣＢ２ＡＡＰ５和３５Ｓ－－ｐ：ＣＢ２ＡＡＰ６的构建４２４－－－－－－．２．３农杆菌介导３５Ｓ：ＣＢ２ＡＨＬ、ｐ３５Ｓ：ＣＢ２ＡＡＰ６、３５