白介素33在百草枯诱导小鼠急性肺损伤中的作用机制研究.pdf

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1、安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014Aug；49(8)。1027·◇基础医学研究◇白介素33在百草枯诱导小鼠急性肺损伤中的作用机制研究刘晨风，吴小红，曾扬，高同同，于虹，郭彦，孙世惠，周育森摘要目的探讨白介素33(IL一33)在百草枯(PQ)染毒小functionsyndrome，MODS)而导致死亡⋯。由于ALI鼠急性肺损伤(ALI)模型中的表达及作用。方法25只的发病机制较为复杂，目前尚不清楚。其中由化学SPF级雌性BALB／c小鼠平均分为正常对照组，PQ损伤6、强毒除草剂百草枯(paraquat，PQ)中毒所致的12、

2、24、48h组。腹腔注射PQ(30mg／kg)建立小鼠ALI模型ARDS，已导致数千人中毒死亡，病死率高达并于各时间点处死取材。评价肺组织病理变化和炎症细胞70％。白介素33(interleukin一33，IL-33)是IL一1浸润；观察血清白介素1B(IL一1B)、IL-2、IL-6、肿瘤坏死因子家族的新成员，在慢性炎症、心血管疾病和变态反应(TNF一)和肺组织髓过氧化物酶(MPO)水平变化；RT。性等疾病中发挥重要作用J。研究显示IL33PCR、免疫组化和Westernblot分别检测组织中IL．33mRNA既能作为促炎因子活化炎症，加重组织损伤，也可作和蛋白表达水平变化。

3、分析IL-33与病理损伤和炎症指标为染色质相关核因子起转录抑制作用，辅助抑制前关联性以明确IL-33在调解内源性细胞因子及在Au中的炎症基因表达J。但目前鲜有报道评价IL-33在急作用。结果与正常对照组相比，PQ损伤后小鼠肺组织弥漫性损伤伴有严重水肿及大量炎症细胞浸润，促炎细胞因子性炎症中的作用。为此，该实验使用PQ建立小鼠IL-1B、IL-6、TNF—、MPO明显升高，抑炎细胞因子IL-2明显Au模型，系统研究了IL一33表达与Au小鼠的病理下调(P<0．05)；PQ损伤后IL-33在mRNA和蛋白表达水平和炎症细胞因子之间的动态变化关系，阐述了IL．33均显著下调(P<0．

4、05)。关联性分析显示IL-33与病理损伤在化学毒物造成的ALI中的重要调节作用。指标，IL一1B、IL-6、TNF一、MPO均呈明显负相关(P<0．05)，1材料与方法与IL-2呈正相关趋势，但差异无统计学意义。结论IL-33在PQ诱导小鼠Au中表达水平下降，提示可能在调解内源1．1材料与试剂PQ购自上海先正达有限公司；性炎症因子平衡中发挥重要作用，可为临床干预和治疗ALIGoatanti—mouseIL-33抗体购自美国R&D公司；中的新靶点。性粒细胞抗体购自美国SantaCruz公司；Rabbitanti—关键词白介素33；百草枯；急性肺损伤；炎症GAPDH抗体、Rabb

5、itanti—goatIgG(HRP标记)和中图分类号S482．4；R363．1；R392．7AntirabbitIgG(HRP标记)均购自美国CellSigna—文献标志码A文章编号1000—1492(2014)08—1027—06ling公司；IL-1B、IL-2、IL-6和肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor一，TNF—)ELISA预包被试剂急性肺损伤(acutelunginjury，Au)发展到严重盒均购自北京达科为生物技术有限公司；髓过氧化阶段称为急性呼吸窘迫综合征(acuterespiratorydis—物酶(myeloperoxidase，MPO)

6、ELISA试剂盒购自荷tresssyndrome，ARDS)，最终因形成全身炎症反应综兰Hycuhbiotechnology公司；总RNA提取试剂盒购合征(systemicinflammatoryresponsesyndrome，自德国Qiagen公司；RNA反转录cDNA试剂盒购自SIRS)和多器官功能障碍综合征(multipleorgandys．北京全式金生物技术公司；实时荧光定量PCR(SYBRGreen)试剂盒购自北京天根生物技术有限2014—02—25接收基金项目：国家自然科学基金(编号：81371805)；国家重点基础研究公司；蛋白酶抑制剂混合物购自北京普利莱生物技

7、发展计划(973)(编号：2012CB518905)术有限公司；其余试剂均为国产分析纯，由国药(北作者单位：。安徽医科大学北京微生物流行病研究所，合肥230032京)化工集团提供。北京微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点1．2动物模型建立及分组25只SPF级雌性实验室，北京100071BALB／c小鼠，6～8周龄，体重(20±1)g，购自军事作者简介：刘晨风，男，硕士研究生；孙世惠，女，副教授，硕士生导师，责任作者，E—mail：sail—医学科学院实验动物中心。小鼠随机平均分为5s