携带低氧诱导因子1α慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因的表达.pdf

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1、中国组织工程研究第,8誊第28期2014—07—02出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchJulyZ2014VoL18,No.28WWW.CRTER.org携带低氧诱导因子1a慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因的表达付志杰’~,张巨峰’。,王大平’3陈洁琳’',3段莉’3,何美建’~,李庆庆’r2李文翠’,2熊建义’。(’汕头大学医学院深圳二院I临床学院,广东省深圳市518035;深圳市第二人民医院骨科,广东省深圳市518035;。深圳市组织工程重点实验室,广东省深圳市518035)文章亮点:1实验使

2、用慢病毒载体系统,将具有成骨作用的人低氧诱导因子1a整合到大鼠骨髓间充质干细胞中,提高了付志杰,男,1988年生,成骨基因的表达水平,可促进其向成骨方向分化,结果表明将人低氧诱导因子1d应用于骨组织工程是可行的。湖北省孝感市人,汉族,2实验具有较大的创新性及先进性,为下一步应用低氧诱导因子1a修饰的骨髓间充质干细胞治疗骨缺损的动在读硕士,主要从事创伤骨科、骨组织工程研究物实验研究奠定基础。骨组织工程研究未来的趋势将集中在生长因子、种子细胞和支架材料的远期生物安全性方面,这是将骨组织工程应用于临床的最重要一步。通讯作者:熊建义,孝受,关键词:主任医师,硕士

3、生导师,于细跑骨髓于缅匏:低氧诱导因子Q;骨髓闻充囊干绥跑:基因转染:骨缺损:慢病毒载体:骨组织I程:深圳市第二人民医院骨科,广东省深圳市戎骨基因:成骨活性;广东雀自然科学基金518035主题词:骨髓;闻羲于细瞧:缺氧诱导因子1a亚基:淹病毒蒋:转染doi:l03969/jissn20954344基金资助:201428005广东省自然科学基金IS2o1201Q0o81291:深

4、唏战略性新兴产监发展专项资金(202o6141545512o11:深圳市【htp:llwww,crterorg1科岔凄国际合作项目(GJHZ201304121539o6740)口

5、市弼劬委技术开发项目(C)(Zz2012o61416o234842)中图分类号:R3942文献标识码:A摘要文章编号:2095-4344背景:人低氧诱导因子1a可调控其下游成骨及成血管基因的表达,具有提高成骨活性的作用。(2014)28-04455-08目的:观察携带人低氧诱导因子1a慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。稿件接受:2014-05-21方法:通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1a,构建携带低氧诱导因子1a的慢病毒表达质粒Lenti—HIF—lo-eGFP,与LentiPacHlV混合包装质粒共包装293Ta

6、细胞,获得病毒{采用全骨髓直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,使用流式细胞仪对骨髓间充质干细胞进行鉴定。分别在慢病毒感染骨髓间充质干细胞1,4,7,14d后,用实时荧光定量PCR检测骨髓间充质干细胞中成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶的表达水平。结果与结论:Lenti-HIF-1a—eGFP有效地感染骨髓间充质干细胞,实时荧光定量PCR检测结果显示成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶在Lenti—HIF—lo-eGFP感染后第4天开始明显过表达,且持续至14d。结果表明低氧诱导因子1a可以提高骨髓间充质干细胞

7、的成骨活性。FuZhi-jie,Studyingformaster’s付志杰.张巨峰王大平。陈洁琳段裁.伺美建。李夫庆.李文翠.熊建义,携带低氧诱导因子1Q慢病毒degree.ShenzhenSecondHospitalClinicalSchoolof感染大鼠骨髓充质干细胞后或骨基因的表达.中国组织I程磅究.2014.18(28):4455-4462,ShantouUniversityMedicalCoilege,Shenzhen518035,Expressionofosteogenicgenesinratbonemarrowmesenchymalste

8、mcellsinfectedGuangdongProvince,China;DepartmentofO~hopedics,bylentiviruscarryinghypoxia—induciblefactor-1alphaShenzhenSecondPeople’sHospital,Shenzhen518035,FuZhi-jie’一,ZhangJu-feng’'一,WangDa.ping’,3,ChenJie—lin’,一,DuanLi’r3,HeMei-jian’一,GuangdongProvince,ChinaLiQing-qing’一LiWen—

9、cui’一XiongJian-yi’',。(’ShenzhenSecondHos

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