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1、携带低氧诱导因子1α慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因的表达付志杰1，2，张巨峰1，2，3，王大平1，2，3，陈洁琳1，2，3，段 莉1，2，3，何美建1，2，李庆庆1，2，李文翠1，2，熊建义1，2，31汕头大学医学院深圳二院临床学院，广东省深圳市 518035；2深圳市第二人民医院骨科，广东省深圳市 518035；3深圳市组织工程重点实验室，广东省深圳市 518035Expressionofosteogenicgenesinratbonemarrowmesenchymalstemcell
2、sinfectedbylentiviruscarryinghypoxia-induciblefactor-1alpha FuZhi-jie1,2,ZhangJu-feng1,2,3,WangDa-ping1,2,3,ChenJie-lin1,2,3,DuanLi1,2,3,HeMei-jian1,2,LiQing-qing1,2,LiWen-cui1,2,XiongJian-yi1,2,31ShenzhenSecondHospitalClinicalSchoolofShantouUniversit
3、yMedicalCollege,Shenzhen518035,GuangdongProvince,China;2DepartmentofOrthopedics,ShenzhenSecondPeople’sHospital,Shenzhen518035,GuangdongProvince,China;3ShenzhenKeyLaboratoryofTissueEngineering,Shenzhen518035,GuangdongProvince,China摘要 背景：人低氧诱导因子1α可调控其下游
4、成骨及成血管基因的表达，具有提高成骨活性的作用。目的：观察携带人低氧诱导因子1α慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。方法：通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1α，构建携带低氧诱导因子1α的慢病毒表达质粒Lenti-HIF-1α-eGFP，与LentiPacHIV混合包装质粒共包装293Ta细胞，获得病毒；采用全骨髓直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞，使用流式细胞仪对骨髓间充质干细胞进行鉴定。分别在慢病毒感染骨髓间充质干细胞1，4，7，14d后，用实时荧光定量P
5、CR检测骨髓间充质干细胞中成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶的表达水平。结果与结论：Lenti-HIF-1α-eGFP有效地感染骨髓间充质干细胞，实时荧光定量PCR检测结果显示成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶在Lenti-HIF-1α-eGFP感染后第4天开始明显过表达，且持续至14d。结果表明低氧诱导因子1α可以提高骨髓间充质干细胞的成骨活性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐
6、血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程全文链接：窗体顶端locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame关键词：干细胞；骨髓干细胞；低氧诱导因子1
7、α；骨髓间充质干细胞；基因转染；骨缺损；慢病毒载体；骨组织工程；成骨基因；成骨活性；广东省自然科学基金； Abstract：BACKGROUND:Humanhypoxia-induciblefactor-1alphacanregulatetheexpressionofosteogenicandangiogenicgenes,andpromoteosteogenicactivity.OBJECTIVE:Toobservetheexpressionofosteogenicgenesinratbone
8、marrowmesenchymalstemcellscarryinghumanhypoxia-induciblefactor-1alphaslowvirusinfection.METHODS:Hypoxia-induciblefactor-1alphawasobtainedfromHelacellsusingRT-PCR.Lentivirusexpressionvectorplasmidcarryinghypoxia-induciblefactor-1alpha(Lenti-HIF
