实验八 微生物的生理生化反应

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1、实验八微生物的生理生化反应何伟2006－04一、实验目的微生物代谢与其他生物代谢有着许多相似之处，也有不同之处。微生物代谢重要持征之一，就是代谢类型的多样性。即使同属化能异养菌中的不同微生物，它们分解生物大分子的能力，分解利用含碳化合物、含氮化合物的途径和产生代谢产物也各不相同等等。由于微生物代谢类型多样性，使得微生物在自然界的物质循环中起着重要作用，同时也为人类开发利用微生物资源提供更多的机会与途径。此外，微生物代谢类型多样性具体表现在生化反应的多样性，因此人们在微生物的分类鉴定工作中，常利用其生化反应作

2、为重要依据。二、实验器材培养基：油脂培养基、淀粉培养基、明胶培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖）、菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、普通变形杆菌、绿脓杆菌、产气肠杆菌三、实验原理和步骤大分子水解实验不同微生物分解利用生物大分子能力各有不同。只有那些能够产生并分泌跑外酶的微生物才能利用大分子有机物。油脂水解、淀粉水解、明胶液化脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶糖发酵实验细菌在分解糖或醇(如葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、甘油)的能力有很大的差异。有些细菌发醇某种糖后产生各种有机酸(如乳酸、醋酸、甲酸、琥珀酸)及各种

3、气体(如氢、甲烷、二氧化碳)。有的细菌只产酸不产气。酸的产生可利用指示剂来指示。在配制培养基时可预先加入溴甲酚紫【pH5(黄)－pH7(紫)】。当细菌发酵糖产酸时，可使培养基由紫色变为黄色。气体的产生可由糖发酵管中倒置的杜氏小管中有元气泡来证明。IMViC反应：吲哚实验甲基红实验V.P.实验柠檬酸盐实验H2S实验实验名称培养基菌种接种方式现象大分子水解实验油脂水解油脂培养基金黄葡、枯草平板水解出现红色斑点淀粉水解淀粉培养基枯草、大肠平板加入碘液后出现透明水解圈明胶液化明胶培养基大肠、枯草、绿脓穿刺沿穿刺接种

4、的痕迹进行明胶的液化水解糖发酵实验葡萄糖发酵葡萄糖发酵培养基大肠、变形试管颜色变化、有气泡积聚乳糖发酵乳糖发酵培养基大肠、变形试管同上IMViC反应吲哚实验蛋白胨水培养基大肠、产气试管产生红色玫瑰吲哚甲基红实验葡萄糖蛋白胨水培养基大肠、产气试管丙酮酸分解为小分子酸，使得培养基颜色变红V.P实验葡萄糖蛋白胨水培养基大肠、产气试管丙酮酸不分解，氧化后与α-萘酚形成红色柠檬酸盐实验柠檬酸盐培养基大肠、产气斜面可以利用柠檬酸盐，pH升高，颜色变蓝H2S实验H2S培养基大肠、产气穿刺产生PbS黑色沉淀