分子生物考试内容.doc

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1、一、名词解释1.卫星DNA(satelliteDNA):人类基因组中的串联重复序列,以各自的核心序列首尾相连多次重复,为高度重复序列,主要存在于染色体的着丝粒区域,通常不被转录。2.反向重复序列(invertedrepeat,IR):在同一多核苷酸链内的相反方向上存在的重复的核苷酸序列。3.基因组(genome):一个细胞或一种生物体的整套遗传物质,包括基因和非编码DNA。4.多基因家族(multigedefamily):是指由某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因。5.假基因(pseudogene):在多

2、基因家族中,某些成员并不产生有功能的基因产物,这些基因称为假基因。6、限制性片段长度多态性(restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP):多态性出现在限制性核酸内切酶的酶切位点序列中,用某个内切酶水解基因组的某段序列时,在同种的不同个体之间该段序列可能被酶解成长短不等的几个DNA片段。7、转座因子(transposableelement):是一类在细菌染色体、质粒或噬菌体之间自行移动并具有转位特性的独立的DNA序列。8、原癌基因(protooncogenes):存在于正

3、常细胞基因组中的癌基因,在正常情况下处于静止或低表达状态,对维持细胞正常功能具有重要作用;但在异常表达时,其产物可使细胞无限分裂。9、抑癌基因(antioncogene):存在于正常细胞内的一类可抑制细胞过度生长与增殖的基因,从而有潜在抑癌作用。当这类基因发生突变、缺失或失活时,可引起细胞恶性转化而导致肿瘤的发生。10、核酸探针(nucleicacidprobe):特指能与靶核酸序列发生碱基互补杂交,并能由其标记被特异性检测的核酸分子。11、分子克隆(molecularcloning):在体外对DNA分子进行重

4、组,构建成具有自主复制能力的重组DNA分子,再导入宿主细胞进行大量扩增,左中获得大量同一的DNA分子。12、载体(vector):携带靶DNA片段进入宿主细胞,进行扩增和表达的运载工具。13、RT-PCR(逆转录PCR):是以细胞内总RNA或mRNA作为材料进行核酸扩增的技术。14、转化(transformation):将重组DNA导入细菌,使其在细胞内扩增及表达的过程。15、基因重叠(geneoverlapping):基因组DNA中某些序列被两个或两个以上的基因所共有。16、同尾酶(isocaudarner)

5、:有些限制性内切酶虽然识别序列完全不相同,但切割DNA后产生相同的粘性末端。17、DNA重组(RecombinantDNA):不同来源的DNA,通过磷酸二酯键连接而重新组合成新的DNA分子的过程。二、大题及填空1、转座因子的类型:插入序列、转座子和Mu噬菌体2、真核生物基因组DNA重复序列的类型:串联重复序列和分散重复序列,前一种成簇存在于染色体的特定区域,后一种分散于染色体的位点上。3、癌基因的类型:病毒癌基因和细胞癌基因(原癌基因)4、质粒的分类复制机制严紧型松弛型 功能F质粒R质粒Col质粒 转移方式接合

6、型可移动型自传递型 大小小型(1.5kb~15kb) 大型(60kb~120kb) 宿主范围窄宿主谱型广宿主谱型5、质粒提取的步骤①细菌培养物的生长②细菌的收获和裂解③质粒DNA的纯化6、核酸提取的步骤①核酸的释放②核酸的分离纯化③核酸的浓缩、沉淀和洗涤7、核酸提取时选择方法和原则①保持核酸一级结构完整②尽量提高核酸制品的纯度8、核酸提取时应去除的污染物有哪些?①非核酸的大分子污染物如蛋白质、多糖和脂类物质等②非需要的核酸分子,分离某一核酸分子时,其他核酸皆为杂质③加入的有机溶剂和某些金属离子9、基因组DNA分

7、离纯化的方法和原理(有机溶剂提取法)方法:酚/氯仿有机溶剂抽提法原理:将生物组织细胞在含EDTA/SDS和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质;再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白质;得到的DNA溶液经乙醇;沉淀或透析等方法纯化。10、质粒DNA提取的原理当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性当加入中和液时,质粒DNA能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清液中蛋白质与染色体DNA不复性而成絮状,离心时可沉淀下来11、原核生物基因组特征①原核生物基因组较小,而且基因数目也较少,基因组中只有一个DNA复

8、制起点。②原核生物的类核结构,没有典型的细胞核结构基因组DNA在蛋白质的协助下,以一定的形式盘曲、折叠包装起来,形成类核③原核生物的操纵子结构,是其基因组的功能单位,包括结构基因,上游的调控区和下游的转录终止信号④原核生物的结构基因中无内含子结构,其RNA合成后不需要经过剪接加工过程⑤具有编码同工酶的基因⑥含有可移动DNA序列12、病毒基因组一般特征①基因组的碱基组成基因数目少,所含信

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