电刺激Meynert基底核对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元形态及神经生长因子表达的影响.pdf

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1、中华物理医学与康复杂志2014年3月第36卷第3期ChinJPhysMedRehabil,March2014,Vo1.36,No.3·221·.研究简报.电刺激Meynert基底核对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元形态及神经生长因子表达的影响于宁波腾文慧王晓亮邓加平王乃东【摘要】目的观察电刺激Meyne~基底核(NBM)对血管性痴呆(VaD)大鼠学习记忆能力以及海马CA1区神经元形态和神经生长因子(NGF)表达的影响,并初步探讨电刺激NBM对VaD大鼠认知功能的改善作用及可能作用机制。方法采用随机数字表法将

2、30只SD大鼠分为假手术组、VaD组及电刺激组,选用双侧颈动脉永久性结扎术将VaD组及电刺激组大鼠制成VaD大鼠模型,假手术组大鼠仅分离双侧颈动脉。电刺激组大鼠于制模后埋人颅内电极并给予NBM电刺激,电刺激每次持续30min,共治疗14d。于电刺激治疗结束后1—3d期间每天采用Morris水迷宫检测各组大鼠制模后学习记忆能力,于最后1次水迷宫检测结束后分别采用尼氏染色及NGF免疫组化染色观察各组大鼠海马CA1区神经元变化情况。结果实验进行1,2及3d时,发现假手术组、电刺激组大鼠逃避潜伏期均较VaD组明显缩

3、短(P<0.05),并且上述时间点均以假手术组逃避潜伏期缩短幅度较显著,与电刺激组间差异亦具有统计学意义(P<0.05)。电刺激组尼氏染色结果与假手术组相似,可见神经元排列较整齐,存活神经元数量较多,且细胞体积较大,尼氏小体丰富,但数量不及假手术组。另外电刺激组NGF阳性细胞百分比[(15.133±2.735)%]及假手术组阳性细胞百分比[(19.964.4-4.065)%]均较VaD组[(6.592±2.970)%]明显增大(P<0.05)。结论电刺激NBM可改善VaD大鼠学习记忆功能,其治疗机制可能与上

4、调海马CA1区尼氏小体与NGF含量有关。【关键词】Meyne~基底核;血管性痴呆;Morris水迷宫;神经生长因子血管性痴呆(vasculardementia,VaD)是指因血管病变引起每千克体重800mg腹腔注射麻醉后,以仰卧位将大鼠固定于实的获得性智能障碍综合征,主要与缺血性脑血管病变有关。目验台上,去除颈部皮毛,经常规消毒后行颈正中切口,钝性分离前临床采用药物治疗VaD的疗效并不理想,而脑深部电刺激颈动脉,采用手术线结扎双侧颈动脉后缝合切口,待大鼠清醒(deepbrainstimulation,DBS

5、)作为一种改善运动功能障碍的干后置人动物房内饲养。假手术组大鼠只分离出双侧颈动脉并预方法已广泛应用于临床治疗中。近年来有研究表明,DBS对不结扎,其饲养环境与VaD组及电刺激组相同。痴呆患者认知功能亦具有一定改善作用,可作为治疗痴呆的有效三、颅内电极埋人及电刺激手段之一⋯。目前采用DBS治疗VaD的适宜电刺激强度、频率、于制模后第7天时参照实验动物图谱将VaD组、电刺激时间及作用机制仍未完全明确。本实验通过观察电刺激大鼠组大鼠固定于立体定位仪上,按照如下参数(前囟后1.5mm,左Meynert基底核(nuc

6、leusbasalisofMeynert,NBM)对VaD大鼠认侧旁开2.8mm,深度7.6mn1)进行立体定位,选用牙科钻磨一知功能的改善作用,初步探讨其可能作用机制,为临床采用DBS个约2mm圆孔并埋人电极,采用牙托粉及502胶固定电极。手段改善VaD患者认知功能提供理论基础。现报道如下。待大鼠清醒后放回笼内,持续饲养7d后进行电刺激。电刺激时确定大鼠处于清醒状态,将电刺激仪与颅内电极相连,设定材料与方法电刺激参数如下:刺激时程0.5ms,刺激频率50Hz,刺激强度一200A,每次刺激30min,每天刺

7、激1次,持续刺激14d;VaD、主要实验材料主要实验动物为Sprague—Dawley雄性大鼠30只,体重300~组大鼠只将电刺激仪与颅内电极相连,期间并未给予电刺激。400g;主要实验仪器包括Morris水迷宫、SP一6N型大鼠脑立体定四、Morris水迷宫检测位仪(日本Narishige公司)、8EN一7203型电刺激仪(日本产)、冰于电刺激完成后次日开始进行Morris水迷宫测试,随机选冻切片机(德国Sartorius公司产)、电子天秤(德国Sartorius公取Morris水迷宫任意一个象限顶点将大

8、鼠放入水迷宫中,记录司)、FluoviewFV500型激光共聚焦扫描显微镜(日本Olympus公大鼠找到平台的时间为逃避潜伏期,若不能在90S内找到平司产)、电热恒温水浴锅(天津泰斯特仪器有限公司产)等。台,则由实验人员用手引导大鼠爬上平台,允许大鼠在平台上二、分组及VaD模型制备停留10S,然后将大鼠放回鼠笼内;间隔20min后再选取剩余任采用随机数字表法将上述SD大鼠分为假手术组、VaD组意一个象限顶点将大鼠

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1、中华物理医学与康复杂志2014年3月第36卷第3期ChinJPhysMedRehabil,March2014,Vo1.36,No.3·221·.研究简报.电刺激Meynert基底核对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元形态及神经生长因子表达的影响于宁波腾文慧王晓亮邓加平王乃东【摘要】目的观察电刺激Meyne~基底核(NBM)对血管性痴呆(VaD)大鼠学习记忆能力以及海马CA1区神经元形态和神经生长因子(NGF)表达的影响,并初步探讨电刺激NBM对VaD大鼠认知功能的改善作用及可能作用机制。方法采用随机数字表法将

2、30只SD大鼠分为假手术组、VaD组及电刺激组,选用双侧颈动脉永久性结扎术将VaD组及电刺激组大鼠制成VaD大鼠模型,假手术组大鼠仅分离双侧颈动脉。电刺激组大鼠于制模后埋人颅内电极并给予NBM电刺激,电刺激每次持续30min,共治疗14d。于电刺激治疗结束后1—3d期间每天采用Morris水迷宫检测各组大鼠制模后学习记忆能力,于最后1次水迷宫检测结束后分别采用尼氏染色及NGF免疫组化染色观察各组大鼠海马CA1区神经元变化情况。结果实验进行1,2及3d时,发现假手术组、电刺激组大鼠逃避潜伏期均较VaD组明显缩

3、短(P<0.05),并且上述时间点均以假手术组逃避潜伏期缩短幅度较显著,与电刺激组间差异亦具有统计学意义(P<0.05)。电刺激组尼氏染色结果与假手术组相似,可见神经元排列较整齐,存活神经元数量较多,且细胞体积较大,尼氏小体丰富,但数量不及假手术组。另外电刺激组NGF阳性细胞百分比[(15.133±2.735)%]及假手术组阳性细胞百分比[(19.964.4-4.065)%]均较VaD组[(6.592±2.970)%]明显增大(P<0.05)。结论电刺激NBM可改善VaD大鼠学习记忆功能,其治疗机制可能与上

4、调海马CA1区尼氏小体与NGF含量有关。【关键词】Meyne~基底核;血管性痴呆;Morris水迷宫;神经生长因子血管性痴呆(vasculardementia,VaD)是指因血管病变引起每千克体重800mg腹腔注射麻醉后,以仰卧位将大鼠固定于实的获得性智能障碍综合征,主要与缺血性脑血管病变有关。目验台上,去除颈部皮毛,经常规消毒后行颈正中切口,钝性分离前临床采用药物治疗VaD的疗效并不理想,而脑深部电刺激颈动脉,采用手术线结扎双侧颈动脉后缝合切口,待大鼠清醒(deepbrainstimulation,DBS

5、)作为一种改善运动功能障碍的干后置人动物房内饲养。假手术组大鼠只分离出双侧颈动脉并预方法已广泛应用于临床治疗中。近年来有研究表明,DBS对不结扎,其饲养环境与VaD组及电刺激组相同。痴呆患者认知功能亦具有一定改善作用,可作为治疗痴呆的有效三、颅内电极埋人及电刺激手段之一⋯。目前采用DBS治疗VaD的适宜电刺激强度、频率、于制模后第7天时参照实验动物图谱将VaD组、电刺激时间及作用机制仍未完全明确。本实验通过观察电刺激大鼠组大鼠固定于立体定位仪上,按照如下参数(前囟后1.5mm,左Meynert基底核(nuc

6、leusbasalisofMeynert,NBM)对VaD大鼠认侧旁开2.8mm,深度7.6mn1)进行立体定位,选用牙科钻磨一知功能的改善作用,初步探讨其可能作用机制,为临床采用DBS个约2mm圆孔并埋人电极,采用牙托粉及502胶固定电极。手段改善VaD患者认知功能提供理论基础。现报道如下。待大鼠清醒后放回笼内,持续饲养7d后进行电刺激。电刺激时确定大鼠处于清醒状态,将电刺激仪与颅内电极相连,设定材料与方法电刺激参数如下:刺激时程0.5ms,刺激频率50Hz,刺激强度一200A,每次刺激30min,每天刺

7、激1次,持续刺激14d;VaD、主要实验材料主要实验动物为Sprague—Dawley雄性大鼠30只,体重300~组大鼠只将电刺激仪与颅内电极相连,期间并未给予电刺激。400g;主要实验仪器包括Morris水迷宫、SP一6N型大鼠脑立体定四、Morris水迷宫检测位仪(日本Narishige公司)、8EN一7203型电刺激仪(日本产)、冰于电刺激完成后次日开始进行Morris水迷宫测试,随机选冻切片机(德国Sartorius公司产)、电子天秤(德国Sartorius公取Morris水迷宫任意一个象限顶点将大

8、鼠放入水迷宫中,记录司)、FluoviewFV500型激光共聚焦扫描显微镜(日本Olympus公大鼠找到平台的时间为逃避潜伏期,若不能在90S内找到平司产)、电热恒温水浴锅(天津泰斯特仪器有限公司产)等。台,则由实验人员用手引导大鼠爬上平台,允许大鼠在平台上二、分组及VaD模型制备停留10S,然后将大鼠放回鼠笼内;间隔20min后再选取剩余任采用随机数字表法将上述SD大鼠分为假手术组、VaD组意一个象限顶点将大鼠

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