不结球白菜高亲和性硝酸盐转运蛋白NRT2.2的克隆和表达分析.pdf

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1、江西农业学报2014，26(9)：6～11ActaAgricuhuraeJiangxi不结球白菜高亲和性硝酸盐转运蛋白NRT2．2的克隆和表达分析孙菲菲，王镇，李建刚。，王夏，孙雪花，侯喜林(1．江苏省南京市蔬菜科学研究所，江苏南京210042；2．南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室，江苏南京2100953．中国科学院土壤环境与污染修复重点实验室、中国科学院南京土壤研究所，江苏南京210008)摘要：以不结球白菜品种“苏州青”为材料，克隆得到了1个高亲和性硝酸盐转运蛋白基因——．2，该基因的全长为1593bp，编码530个氨基酸。序列分析结果表明：BcNRT

2、2．2基因含有AGWGNMG共识别基序，其氨基酸序列与拟南芥NR12．2的同源性为86％；其二级结构主要由一螺旋和自由卷曲构成；预测BcNRT2．2蛋白含有12个跨膜域。实时定量PCR分析结果表明：BcNRT2．2主要在根部表达，并受高浓度硝酸盐的诱导；BcNR12．2在原始叶片中表达量较低，但受低温、高温和干旱胁迫的诱导后而高量表达。关键词：不结球白菜；硝酸盐转运蛋白；克隆；表达；非生物胁迫中图分类号：Q785、Q786文献标志码：A文章编号：1001—8581(2014)09—0006一O6CloningandExpressionAnalysisofGeneBcN

3、RT2．2inNon—headingChineseCabbageSUNFei-fei，WANGZhen，LIJian—gang3，WANGXia，SUNXue—hua，HOUXi一1in(1．NanjingVegetableScienceResearchInstituteofJiangsuProvince，Naming210042，China；2．StateKeyLaboratoryofCropGeneticsandGermplasmEnhancement，NanjingAgriculturalUniversity，Naming210095，China；3．KeyLa

4、boratoryofSoilEnvironmentandPollutionRemediation，ChineseAcademyofSciences；N趴jingInstituteofSoilScience，ChineseAcademyofSei—enees，Naming210008，China)Abstract：Inthisstudy，non—headingChinesecabbage(Br~swacampestrisssp．chinensisMakino)eultivar“Suzhouqing”wasusedasexperimentalmateria1．andahi

5、gh—affinitynitratetransportergeneB小Z2．2wassuccessfullycloned．Thjsgenehadthetotal1engthof1593bp，andencoded530aminoacids．TheresultsofsequenceanalysisshowedthatthegeneBcNR．2con—tainedtheidentifiedsequenceAGWGNMGofMFSsupergenefamily．andtheaminoacidsequencesofBcNR12．2had86％homo1一ogywiththose

6、ofNRI2．2inarabidopsis．ThesecondarystructureofBcNRI2．2wasmainlycomposedofalphahelicesandrandomcoil．ItwaspredictedthattheproteinBcNRrI'2．2contained12transmembranedomains．Real—timequantitativePCRanalysisindi—catedthattheexpressionofBc^『R．2wasfoundmainlyintheroots．andwasinducedbyhighconcent

7、rationofnitrate；theexpres-sionquantityofBcNR12．2inoriginalleafwasrelativelylow，butabiotiestress(1owtemperature，hightemperature，anddrought)couldrapidlyinduceitshigh—quantityexpression．Keywords：Non—headingChinesecabbage；Nitratetransporterprotein；Cloning；Expression；Abioticstress氮是