超低温冷冻保存对七带石斑鱼胚胎酶活性的影响.pdf

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1、蚕蕾=-螋囊曩生■撬棚onlines⋯麓ystem：http：／／ww菇w．jabiotech．org啊■⋯『■-v乏黧菱量昌氯一一超低温冷冻保存对七带石斑鱼胚胎酶活性的影响姜静田永胜翟介明陈松林1农业部海洋渔业可持续发展重点实验室，中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛266071；2上海海洋大学，水产与生命学院，上海201306；3山东莱州明波水产有限公司，莱州261418通讯作者，tianys@ysfri．ac．cn摘要七带石斑鱼(Epinepheluss印咖c)是一种生长速度快、低温下耐受性强具

2、有较高经济价值的海水鱼类，在自然环境中种群数量较少，对其种质资源进行长期保存迫在眉睫。本研究以七带石斑鱼胚胎为实验材料进行种质冷冻保存，探讨超低温冷冻(一196℃)对七带石斑鱼胚胎内超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)、肌酸激酶(creatinekinase，CK)、N／K一ATPase、乳酸脱氢酶(1actatedehydrogenase，LDH)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)~I]谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase，GSH．

3、Px)活性的影响，以检测抗冻剂在冷冻保存中对胚胎的影响。本研究分别测定了经过PM(24％1，2一丙二醇(PG1+16％甲醇(Me0H))、PMG(15．75％1,2．丙二醇+8．75％甲醇(MeOH)+8．75％甘油(Gly))~lPMGT(15．75％1,2一丙二醇+8．75％甲醇(MeOH)+8．75％甘油(Gly)+5％海藻糖(trehalose))3种玻璃化液处理冷冻前后七带石斑鱼胚胎内6种酶活性的变化。结果表明，胚胎分别经过以上3种玻璃化液处理后，6种酶活性均发生显著性变化，与冷冻前相比，冷冻

4、后胚胎内MDA酶活性显著升高(P<0．05)；与之相反，冷冻后胚胎内的SOD、CK、N／K．ATPase、LDH和GSH—Px酶活性与冷冻前相比，均显著下降，且差异显著(P<0．05)。而在PM玻璃化液处理后的未冷冻胚胎中N／K．ATPase的表达量与对照组无显著性差异(P>O．05)。冷冻使MDA酶活性显著升高，而使其他5种酶的表达量水平降低。PM玻璃化液对CK和N．+／K一ATPase的活性影响较小，说明对胚胎具有一定的保护作用。本研究为七带石斑鱼胚胎超低温冷冻保存提供理论依据。关键词七带石斑鱼，超

5、低温冷冻保存，胚胎，酶活性EffectsofCryopreservationonEnzymeActivityinSeven—bandGrouper1一‘'1^●。一1EpinephelusseptemlasctatusEmOr、厂OsJIANGJing，。TIANYong-ShengZHAIJie-MingCHENSong-LinlKeyLaboratoryofSustainableDevelopmentofMarineFisheries，MinistryofAgriculture，YellowSeaF

6、isheriesResearchInstitute，ChineseAcademyofFisherySciences，Qingdao266071，China；2CollegeofFisheriesandLifeScience，ShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306，China；3MingBoAquaticCo．Ltd．，Laizhou261418，ChinaCorrespondingauthor,tianys@ysfri．ae．cnAbstractSeven-band

7、grouper(Epinephelusseptemfasciatus)isaseawaterfishwithhigheconomicvaluesthatgrowfastandtoleratestrongwithlowtemperature．Populationquantityislessinthenaturalenvironment，andthegermplasmresourcesforlong-termpreservationareimminent．Therefore，basedonthecryopr

8、eservationofseven—bandgrouperembryos，theeffectsofcryopreservation(一196oC)ontheenzymeactivity(superoxidedismutase(SOD)，creatinekinase(CK)，N／KATPase，lactatedehydrogenase(LDH)，基金项目：国家高技术研究发展计划(863)(No．2012AA10A402和No．2012AA10