不同冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的影响

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时间:2019-02-03

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1、塑鍪重奎兰堡主堂垡笙奎2.3.1标本采集⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯.192.3.2实验分组⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..192.3.3鼠皮冷冻保存与复温⋯⋯⋯⋯⋯。⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192.3.4琥珀酸脱氢酶法测定鼠皮活性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..192.4数据处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..232.4.1计算皮肤活力值及皮肤活力百分率⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯232.4.2统计学分析⋯.........⋯⋯⋯...⋯⋯.........⋯...⋯...⋯232.4.3质量控制与偏倚的防止⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..23三结果.⋯.......⋯..⋯.........⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯243.1不同预处理时间对鼠皮活性的影响⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯.243.2不同冷冻保护剂对鼠皮活性的影响⋯⋯....⋯⋯.........⋯.........⋯28四讨论.........⋯....⋯..............⋯......⋯....⋯...⋯⋯⋯⋯⋯304.1移植皮肤的活性对创面的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯.⋯⋯304.2冷冻保存引起细胞损伤的机理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..304.3冷冻保存方法

3、对皮肤活性的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯314.4冷冻保护剂对皮肤活性的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..324.5海藻糖在皮肤保存中的应用研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯334.6研究不足与改进⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯.34参考文献.......⋯..⋯.......⋯..............⋯.......⋯......⋯⋯.⋯.35攻读硕士期间发表的学术论文及研究成果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..39致谢⋯.⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40内蒙古大学硕士学位论文一引言近年来随着科学技术的

4、不断发展,作为低温生物学研究中重要技术之一的低温保存,正逐渐成为临床工作中一个重要的组成部分,其中皮肤组织的低温保存对于烧伤患者的救治起着十分重要的作用。皮肤是人体覆盖面积最大、功能最重要的组织器官之一。当皮肤由于严重烧伤、外伤或局部感染而大面积缺损时,必须通过皮肤移植术将裸露的创面缩小到最小限度,但当皮肤缺损总面积超过自身的30%时,患者就没有足够多的自体皮用来覆盖裸露的创面,如果不能及时通过皮肤移植来覆盖裸露创面,就有可能造成体液大量流失、多种有害介质释放和创面感染,严重的甚至会发生全身侵袭性感染,引发多脏器功能衰竭从而危及患者生命

5、【J】。因此对于大面积烧伤的患者而言,尽快进行皮肤移植封闭创面是提高治愈率的重点,并且其治疗康复是一个漫长而复杂的过程。创面覆盖物不仅要起到暂时保护的作用,还应该同时具有促进组织细胞修复的功能,在众多的创面覆盖物中,采用异体、异种皮封闭创面仍然是大面积烧伤治疗的首选【2J。低温生物学研究的不断深入以及医疗设备的日益完善,都促进了皮肤低温保存工作的开展,为深度烧伤患者创面的及时处理提供了有利的条件【3】。但是在低温保存过程中低温损伤导致的皮肤细胞活力的下降通常会大大影响移植皮肤的成活和总体治疗效果,这仍然是目前大面积深度烧伤患者治愈率无法

6、提高的重要原因之~【4】。为了进一步提高保存后皮肤的活性,解决低温损伤问题,必须加强低温生物学方面的基础研究,如冷冻保存造成细胞损伤的作用机制;对各细胞器功能和结构、细胞内各种重要的酶和离子、细胞骨架、细胞黏附复合体的影响;冷冻保护剂的保护机制、细胞毒性以及优化选择,最终目的是为了寻求一种更加安全、有效、简便的皮肤低温保存方法岭j。内蒙古大学硕士学位论文1.1.1皮肤的结构1.1皮肤冷冻保存的基础皮肤是身体表面包在肌肉外面的组织,是人体最大的器官,皮肤的重量约占人体重的16%,它不单纯属上皮组织,而是一个多功能的重要器官。皮肤由表皮、真

7、皮、皮下组织三部分构成,附有毛发、皮脂腺、汗腺和指甲等,其中毛发和指甲是表皮角质化后所形成的特殊结构,汗腺和皮脂腺是分布在真皮之中的腺体。皮下组织多是疏松结缔组织和脂肪组织,是皮肤与深部组织之间联系的桥梁,皮肤与肌肉、骨膜通过皮下的筋膜、腱膜等相连结,使皮肤能够保持一定的稳定性和松动性。表皮:成人的表皮主要由角质细胞组成,此外还包含有黑色素细胞、Langerhans细胞和Merkel细胞等。表皮层由内向外又可分为基底细胞层、棘层、颗粒层、透明层和角质层,这反映了表皮细胞在角质化过程中的演变。基底层是表皮细胞中分裂增殖能力最强的一层细胞,

8、故又名发生层,它呈柱状或方形,排列于深面的基膜上。棘层细胞也有分裂增殖能力,但仅限于接近基底层的细胞。颗粒层细胞含有许多透明角质颗粒,它由规则排列的角质细胞构成,起到保护机体的作用。在身体任何部位的皮肤,基

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