铅对小鼠海马β-位点-淀粉样前体蛋白剪切酶-1和Bax及β淀粉样蛋白42蛋白表达以及学习记忆能力的影响.pdf

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1、环境与健康杂志2012年7月第29卷第7期JEnvironHealth,July2012,Vo1.29,No·7·623·【论著】铅对小鼠海马I3一位点一淀粉样前体蛋白剪切酶一1和Bax及I3淀粉样蛋白42蛋白表达以及学习记忆能力的影响崔卫刚,李海斌,王松涛,陶晶‘1.新乡医学院人体解剖学教研室,河南新乡453003;2.新乡医学院公共卫生学系摘要:目的探讨乙酸铅对小鼠海马B一位点一淀粉样前体蛋白剪切酶一1(p—site—APPcleavageenzyme-1,BACE一1)、Bax、B淀粉样蛋白42(B—amyloidprotein,A1342)蛋白表达以及

2、学习记忆能力的影响。方法将44只6月龄SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分成4组,分别为对照(生理盐水)组和低(10mg/kg)、中(30mg/kg)、高(60mg/kg)剂量乙酸铅染毒组,每组11只。采用腹腔注射方式进行染毒,染毒容量为20ml/kg,隔日染毒1次,共注射7次。采用Westemblot法检测小鼠海马组织内BACE1、sAPP13和Bax蛋白的表达情况;采用ELISA法检测A1342蛋白的表达情况;采用免疫组化双标染色观察BACE1和NeumnalC1assHI13-Tubulin(Tuj1)阳性定位情况;末次染毒后,采用Morris水迷宫实验

3、检测小鼠的学习记忆能力变化。结果与对照组相比,30和60mg/kg乙酸铅染毒组小鼠海马内BACE1、sAPP13、Bax和A1342蛋白的表达水平均显著升高,差异有统计学意义(P之0.01);而10mg/kg乙酸铅染毒组小鼠海马内BACE1、sAPP13、Bax蛋白的表达水平无显著改变。且随着乙酸铅染毒剂量的升高,小鼠海马内BACE1、sAPP13、Bax和A1342蛋白的表达水平均呈上升趋势。BACE1阳性和Tujl阳性存在共定位现象。与对照组比较,30、60mg/kg乙酸铅染毒组小鼠的逃避潜伏期显著延长,穿越平台次数显著减少,差异有统计学意义(P

4、),10mg/kg乙酸铅染毒组与对照组差异无统计学意义。结论铅暴露可引起海马BACE1和Bax及A1342蛋白表达上调,并可引起小鼠学习记忆能力降低。关键词:铅;3-分泌酶;细胞凋亡中图分类号:R994.6文献标志码:A文章编号:1001—5914(2012)07—0623—04EfectsofLeadAcetateonBACE1,BaxandAI342ProteinExpressioninHippocampusandLearningandMemoryAbilityamongMiceCU/Wei-gang,LIHai-bin,WANGSong-tao,eta1

5、.Departmentof胁marAnatomy,XinxiangMedicalUniversity,Xinxiang,He’nan453003,ChinaAbstract:0bjectiveToinvestigatetheefeclsofleadacetateonBACE1,Baxproteinexpres,don,andA1342expressioninthehippocampusofmice.MethodsForty—fourC57BL/6SPFmicewererandomlydividedinlofourgroups。l1ineach.vehicle—

6、treatedgroupandleadacetate-treatedgroup(10,30and60ms/ks,throughintraperitonealinjection,everytwodaysforseventimes,20mggforeachmice).TheproteinexpressionchangesofBACE1,sAPP13andBaxin}LippocampusweretestedbyWesternblot.TheA1342proteinexpressionwasobservedbyELISA,therelationsofBACE1and

7、NeuronalClassIllBrubulin(Tuj1)weretestedbydoubleimmunofluorescencestaining,andthechangesoflearningandmemory、NeretestedbyMorriswatermazeafterthelastinjectionofleadacetate.ResultsTheproteinexpressionofBACE1.sAPP13andBaxandalsotheproteinexpressionofA1342wereincreasedin30mg/kgand60mg/kg

8、leadacetate-treated

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