靶向肝癌磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3分子探针的构建及其在HepG2细胞中的磁共振成像.pdf

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1、·142·中华肝脏病杂志2014年2月第22卷第2期ChinJHepatol，February2014，Vo1．22，No．2靶向肝癌磷脂酰肌醇蛋白聚糖一3分子探针的构建及其在HepG2细胞中的磁共振成像顾燕曾燕郭犬静杨静周君刘欣杰王志刚【摘要】目的构建一种靶向肝癌磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)的磁共振(MR)分子探针，并探讨其靶向肝癌HepG2细胞的特异性及体外细胞MR成像的可行性。方法用双乳化溶剂挥发法制备聚乳酸一羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒，在纳米粒表面连接GPC3抗体及顺磁性对比剂Gd¨构建靶

2、向肝癌GPC3的MR分子探针，利用荧光显微镜、电镜、Malvern激光粒径测量仪、电感偶合等离子体原子发射光谱仪及1．5TMR扫描仪观察其表征；利用激光共聚焦显微镜观察该探针与GPC3结合的特异性；利用MR扫描仪观察该探针标记肝癌HepG2细胞后的体外MR成像能力。多组均数间用方差分析进行比较，组内两均数间用LSD—检验进行比较。结果成功构建了靶向肝癌GPC3的MR分子探针GPC3抗体一PLGA-Gd纳米粒，其形态规则、呈球形，粒径(495．0±17．5)nm，大小、分布均匀，分散性好，无明显聚集。经电感偶合

3、等离子体原子发射光谱仪测定，1molPLGA上大约载有12tool的Gd3。随着Gd抖浓度的增加，MR扫描时的SNR值相应增加，组间SNR值差异具有统计学意义=1721．131，P<0．05)；体外HegG2细胞寻靶后行MR成像并计算其相应SNR，靶向组SNR值为3．45士0．21，非靶向组SNR值为1．43±0．07，对照组SNR值为1．12±0．03，靶向组的SNR值明显高于非靶向组及对照组(、D—f检验，尸值均<0．05)，非靶向组与对照组的SNR值差异无统计学意义(尸>0．05)。结论应用PLGA纳米

4、粒、GPC3抗体及顺磁性对比剂Gd3构建的靶向肝癌GPC3的MR分子探针在体外能与HepG2细胞特异性结合，且标记HepG2细胞后能在1．5TMR扫描仪上成像，有望应用于活体肝癌的特异性成像，为肝癌的早期诊断提供一种无创的成像手段。【关键词】癌，肝细胞；磷脂酰肌醇蛋白聚糖类，分子探针；磁共振成像；钆Preparationofaglypican-3-targetinghepatocellular~u"cJnomaMRprobeanditsmolecularimaginginHepG2cellsYan,ZengY

5、an,GuoDating,YangJing,2houJun,LiuXinjie,WangZhigang．DepartmentofRadiology,theSecondAfiliatedHospital,ChongqingMedicalUniversi~Chongqing400010,ChinaCorrespondingauthor．"Zeng}ran,Email：1294583212@qq．com[Abstract]ObjectiveToprepareaglypican-3(GPC3)-targetinghe

6、patocellularcarcinomaMRmolecularprobeandtoevaluateitstargetingspecificityusingHepG2cells．MethodsPoly(1actic-CO—glycolicacid)(PLGA)nanoparticleswerepreparedbyadoubleemulsionsolventevaporationmethod，andthesurfaceswereconnectedwithanti．GPC3mono．antibodyandpara

7、magneticsubstanceGdH．Thephysicalpropertiesoftheprobeswereinvestigatedusingfluorescencemicroscopy，electronmicroscopy,Malvernparticlesizeanalysis，inductivelycoupledplasmaatomicemissionspectroscopy(ICP-AES)and1．5TMRimaging．Thespecificityoftheprobestotargetcult

8、uredHepG2cellswasDOl：10．3760／cma．J．1ssn．1007-3418．2014．02．014基金项目：重庆市卫生局医学科研计划重点项目(201卜l-052)作者单位：400010重庆医科大学附属第二医院放射科(顾燕、曾燕、郭大静、杨静、周君、刘欣杰)；重庆医科大学超声影像学研究所(王志刚)顾燕女，25岁，硕士研究生。通信作者：曾燕，Email：1294583212@qq