金银花醇提液对根管粪肠球菌的体外抑菌实验.pdf

《金银花醇提液对根管粪肠球菌的体外抑菌实验.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、·1278-2014年第35卷第9期JournalofOiqiharUniversityofMedicine．2014．V01．35．N0．9．经验交流．金银花醇提液对根管粪肠球菌的体外抑菌实验王淑贤杨旭【摘要】目的通过金银花醇提液在体外对粪肠球菌作用，判断金银花是否存在抑制杀灭粪肠球菌的有效成分，以根管冲洗剂一次氯酸钠(NaOC1)作为对照以评价其作用效果。方法采用热回流浸提、旋转蒸发获取金银花浸液。以平皿打洞法验证粪肠球菌对金银花的敏感性。利用噻唑兰(MTI")辅助判断直接接触实验作用的效果，确定金银花醇提液对粪肠球菌生物膜的最小抑菌浓度(MIC

2、)。结果400mg／ml金银花醇提液抑菌环直径最大，抑菌效果与2％NaOC1无显著差异。最小抑菌浓度为100mg／ml。结论金银花醇提液对粪肠球菌具有一定抑制作用。【关键词】粪肠球菌；金银花；抑菌实验；噻唑兰牙髓病和根尖周疾病是口腔医疗中最常见的疾病之一，10cells／ml的菌液50Ixl培养24h，加入5mg／ml的MTF200在普通口腔科门诊中，因患牙髓病和根尖周疾病来就诊的人孵育4h，根据产生沉淀情况判断MIC。数约占一半，而在牙体牙髓专科中则几乎占到2／3⋯。而根二、结果管治疗是目前公认的首选方法。回顾国外根管治疗成功率的1．金银花醇提液在

3、CLED平皿上的渗透抑菌能力：见表1。研究文献发现根管治疗的成功率在50％～90％之间J，严谨表1药物作用24h后抑菌环直径的治疗中出现持续感染、治疗后出现再次感染这说明根管治疗的疗效不能完全得到控制。目前认为，残留在根管内的细菌是根管治疗失败的主要原因。粪肠球菌是再感染根管内最400l6．71±O．52421．22±1．21常检测到的细菌，研究表明粪肠球菌能够耐受非常苛刻的环20014．23±0．79216．1l士1．07境长期饥饿生存，一旦有足够的营养物质，饥饿细胞可迅速恢lOO11．7l±0．62113．32±1．16复活性。至今未有一种理想根

4、管药物用来对抗粪肠球菌508．744-0．13O．5l2．31±0．89感染。金银花是我国传统的中药植物，据研究表明金银花对250．25l1．75±O．13多种肠道菌具有抑制作用J，提示其可能存在抑制粪肠球菌12．50．125l0．45±016的有效成份。通过本实验为金银花在控制粪肠球菌感染中的应用提供理论基础。经方差分析，各组问差异具有统计学意义(P<0．05)，经一两两比较400mml金银花醇提液抑菌环直径与2％NaOC1、材料和方法1．细菌培养和鉴定：采集齐齐哈尔医学院附属第一医院相比无显著差异；200mg／ml金银花醇提液抑菌环直径与1％口腔

5、科门诊病人中根管再治疗者，其确诊为慢性根尖周炎的NaOC1相比无显著差异；100mg／ml金银花醇提液与0．5％单根管牙。以消毒髓室后用小号H锉锉出根管内的牙胶尖NaOC1相比无显著差异(P>0．05)。碎片和根管内壁玷污层，浸入培养液中送检。CLED鉴定培2．金银花醇提液最小抑菌浓度测定结果：见表2。养基培养过夜，根据培养基说明判断挑取相应菌落，涂片革兰表2MTT辅助判断MIC结果氏染色镜检。如为革兰氏阳性菌另取菌落做生化鉴定。金银花醇提液浓度MTI"反应2．金银花醇提液的制备：金银花粉碎研磨后过4O目筛。400rag／ml金银花粉末浸于乙醇溶液热

6、回流提取1h，抽滤离心，浸液经200mg／ml旋转蒸发仪真空旋蒸至稀膏状。100mg／ml3．研究金银花醇提液在CLED平皿上的渗透抑菌能力：50mg／ml实验分为金银花组、NaOC1组、生理盐水组，用超纯水以倍比25m昏／ml稀释法将金银花醇提液配成浓度为：400mg／ml、200mg／ml、12．5ms／ml100mg／ml、50mg／ml、25mg／ml、12．5mg／ml。配制NaOC1浓空白对照度为：4．0％、2．0％、1．0％、0．50％、0．25％、0．125％。生理盐水为空白对照，无抑菌能力。采用平皿打洞法，即向平皿中滴通过MTr反应

7、生成蓝紫色沉淀判断金银花醇提液最小加3．0×10cells／ml菌液100l涂匀，37℃培养1h后以1ml抑菌浓度为100mg／ml。规格的TIP头在琼脂L均匀打6孔，琼脂封底。逐孔加入梯讨论近年来通过PCR技术的应用，检测出在再治疗根度浓度药液，37℃培养24h后测量抑菌环直径。管中粪肠球菌占发现细菌的77％LsJ，视为根管再感染中的主4．MTF法判断金银花醇提液MIC：将含梯度浓度药液的要致病菌。根管系统的复杂性使得单纯机械性预备不能够清BHI培养基各10frI1分别加入试管中，每管加入1．5×除根管内的粪肠球菌，因此抗菌药物的使用成为临床上控制

8、感染的主要方法。而目前尚缺乏一种既安全，又能有效杀灭作者单位：161000齐齐哈尔医学院第一附属医院(王淑贤