迷迭香酸对新生大鼠海马星形胶质细胞增殖的影响及其机制探讨.pdf

《迷迭香酸对新生大鼠海马星形胶质细胞增殖的影响及其机制探讨.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、山东医药2014年第54卷第8期·基础研究·迷迭香酸对新生大鼠海马星形胶质细胞增殖的影响及其机制探讨晋翔，刘鹏。张雅红(1海军总医院，北京100048；2西京医院)摘要：目的观察迷迭香酸(RA)对新生大鼠海马星形胶质细胞增殖的影响，并探讨其机制。方法取原代培养的新生大鼠海马星形胶质细胞，处理组加入1、5、10、20、40g／mL的RA处理，对照组加相同体积的DMEM。免疫组化细胞染色法计数BrdU阳性细胞数(细胞增殖)，WST一1法检测波长450nm时的OD值(细胞活力)，ELISA法检测细胞培养液上清的脑源性神经营养因子(BDNF)。结果作用72h，2

2、0、40Ixg／mL的RA处理组BrdU阳性细胞数高于对照组及其他浓度RA处理组(P均<0．05)，20g／mL的RA处理组波长450am下的OD值、BDNF均高于对照组及其他浓度RA处理组(P均<0．05)；其余各组两两比较，P均>0．05。结论一定剂量的RA可促进新生大鼠海马星形胶质细胞增殖，该作用与其提高细胞活力、促进BDNF释放有关。关键词：抑郁症；迷迭香酸；星形胶质细胞；增殖；脑源性神经营养因子；大鼠doi：10．3969／j．issn．1002—266X．2014．08．008中图分类号：R749．92文献标志码：A文章编号：1002—266

3、X(2014)08-0025-02抑郁症是最常见的精神疾患之一，多种中药单以2×10／孔接种于多聚赖氨酸包被的24孔板中。体有抗抑郁作用卫J。紫苏草是香苏散的主要成在其培养基中添加BrdU(终浓度10i~molML)，分组分，临床上常用于改善抑郁情绪；迷迭香酸(RA)是处理同1．2．1，每组5个复孔。作用72h后，进行免紫苏草的主要活性成分，具有抗抑郁I4j、抗过敏、疫细胞化学染色。操作按说明书进行，在荧光显微抗炎等多种生物活性。脑源性神经营养因子(BD—镜下观察并照相。计算每低倍视野(×100)BrdU阳NF)是一种脑内合成的蛋白质，能防止神经元受损性

4、细胞数，以此表示细胞增殖程度。伤死亡，促进受损伤神经元的再生及分化等。20131．2．3星形胶质细胞活性检测将星形胶质细胞年1—6月，我们观察了RA对新生大鼠星形胶质细以5×10／mL接种96孑L板，每孑L含100txL培养胞增殖的影响，并探讨其机制。基。分组处理同1．2．1，每组6个复孔，作用68h后1材料与方法检测细胞活力；每孔加入WST．1溶液10L，再继续1．1材料取新生SD大鼠海马组织，分离纯化星培养4h；用酶标仪检测波长450nm时的OD值，以形胶质细胞并鉴定。所有动物有关操作遵循海军总OD值大小表示细胞活性。医院动物伦理委员会的规定，并被认

5、可。RA(Sig—1．2．4星形胶质细胞上清液GDNF检测分组处理ma—Aldrich)，5一溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU，Sigma)，同1．2．1，作用48h或72h，取细胞培养基上清。采BDNF大鼠ELISA检测试剂盒(SunRed)，激光共聚用ELISA法检测GDNF，按说明书操作。焦显微镜(奥林巴斯)。1．2．5统计学方法采用SPSS14．0统计软件。数1．2方法据均以±s表示，两两数据比较前进行方差齐性检1．2．1细胞分组与处理取原代培养的海马星形验，方差齐采用SNK检验，方差不齐采用Dunnett乃胶质细胞，接种于24孔板或96孔板。处理组R

6、A检验。P≤0．05为差异有统计学意义。、经DMEM溶解后添加入不同培养体系，使RA终质2结果量浓度分别为1、5、10、20、40Ixg／mL；对照组加相同2．1RA对星形胶质细胞增殖的影响处理组加入1、5、10、20、40~g／mL的RA作用72h，Brdu阳体积的DMEM。性细胞数分别为(2454-44)、(252±34)、(2544-1．2．2星形胶质细胞增殖检测将星形胶质细胞38)、(3264-43)、(2934-40)爪／LP，对照组为(2364-38)个／LP。20、40p,g／mL的RA处理组与对照组通信作者：刘鹏，E·mail：liupe

7、ngrnaillO0@163．coin25山东医药2014年第54卷第8期及其他浓度RA处理组比较，P均<0．05；其余各组处于缓解状态时与健康对照人群无统计学差异¨；两两比较，P均>0．05。见插页Ⅱ图2。而且，抑郁症患者其脑内BDNFmRNA表达水平低于2．2RA对星形胶质细胞活力的影响处理组加正常人群。电抽搐治疗可增加难治性抑郁患者血清入1、5、10、2O、40g／mL的RA作用72h，波长450中的BDNF，而治疗无效者血清BDNF未见增加，提示nm下的OD值分别为2．66±0．41、2．67±0．35、电抽搐治疗的有效性与患者血清BDNF增加有

8、关。2．85±0．37、3．594-0．40、2．904-0．34，对照组为本研