慢性不可预见性温和应激对大鼠海马星形胶质细胞凋亡的影响

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1、中图分类号：R322.81论文编号：2018307114UDC：密级：公开硕士学位论文慢性不可预见性温和应激对大鼠海马星形胶质细胞凋亡的影响作者姓名：金齐颖学科名称：神经病学研究方向：抑郁症的发病机制研究学习单位：华北理工大学学习时间:3年提交日期:2018年4月10日申请学位类别：临床医学硕士导师姓名：刘昊主任医师单位：华北理工大学附属医院论文评阅人：元小冬教授单位：开滦总医院陈乃耀教授单位：华北理工大学附属医院论文答辩日期：2018年5月23日答辩委员会主席：元小冬教授关键词：抑郁症；海马；星形胶质细胞；凋亡；CUMS唐山华北理工大学201

2、8年6月TheEffectofChronicUnpredictedMildStressontheApoptosisofAstrocytesintheHippocampusofRatsDissertationSubmittedtoNorthChinaUniversityofScienceandTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofMedicinebyJinQiying(Neurology)Supervisor:ProfessorLiuHaoJune,

3、2018独创性说明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：日期：2018年4月10日关于论文使用授权的说明本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定，即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借

4、阅；学校可以将学位论文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检索和交流。作者及导师同意论文公开及网上交流的时间：□自授予学位之日起；□自年月日起。作者签名：导师签名：签字日期：2018年4月10日签字日期：2018年4月10日摘要摘要目的观察慢性不可预见性温和应激（chronicunpredictedmildstress，CUMS）对大鼠海马星形胶质细胞凋亡的影响。方法将90只健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组（n=45）。采用慢性不可预见性温和应激制备大鼠抑郁症模型。应激共包括11种：4℃冰水游泳5min，鼠笼45°

5、倾斜24h，双耳电击5s两次（0.8mA），禁食24h，持续光照24h，42℃热水游泳5min，束缚2h，潮湿垫料24h，夹尾90s，禁水24h，鼠笼摇动15min。在28天内每天随机选取一种刺激方式，要求同种、同类刺激不连续出现。对照组大鼠每天正常抓取一次，不做其他特殊处理。在应激结束后，采用糖水偏好实验、旷场实验和Morris水迷宫实验对大鼠进行行为学检测，分别于造模后1d、7d和14d处死大鼠，对照组大鼠处死时间和模型组相同。采用免疫印迹方法检测大鼠海马组织中的促凋亡蛋白和抑凋亡蛋白的表达水平；采用激光共聚焦方法分别观察大鼠海马中胶质纤维

6、酸性蛋白（glialfibrillaryacidicprotein，GFAP）和Bax，GFAP和Bcl-2，GFAP和Caspase-3的共定位表达情况。应用SPSS17.0统计学软件对本实验所得数据进行统计分析，以P＜0.05表示差异有统计学意义。结果1糖水偏好实验：对照组和模型组大鼠普通水消耗量无显著差异（P＞0.05），模型组大鼠糖水消耗量和糖水偏好百分比均低于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。2旷场实验：与对照组相比，模型组大鼠行走总路程、中央活动时间、直立次数和修饰行为次数均显著降低，差异具有统计学意义（P＜0.01）。3

7、Morris水迷宫实验：模型组大鼠平均逃避潜伏期（escapelatency，EL）高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。4Westernblot检测结果：根据条带分析显示，与对照组比较，CUMS后1d，7d，14d大鼠海马Bax、Caspase-3蛋白表达水平升高，7d时升高最明显，差异具有统计学意义（P＜0.05）。与对照组比较，CUMS后1d，7d，14d大鼠海马Bcl-2蛋白表达水平均下降（P＜0.05）。5免疫荧光双标结果：GFAP、Bax检测结果显示：GFAP为AlexaFluor488激发的绿色荧光，Bax为AlexaF

8、luor594激发的红色荧光，图像融合后可见黄色荧光，说明GFAP和Bax可同时表达；与对照组比较，CUMS7d组大鼠海马Bax阳性细胞数及荧光融合显