满天星异荭草苷对大鼠酒精性肝纤维化保护作用的实验研究.pdf

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1、第38卷第2l期中圈中杂右、V0Nl_38．Issue212013年11月ovember．2013满天星异荭草苷对大鼠酒精性肝纤维化保护作用的实验研究陈永欣，黄权芳，林兴，韦锦斌(1．广西医科大学，广西南宁530021；2．广西中医药大学第一附属医院，广西南宁530023)[摘要]目的：研究满天星异荭草苷对乙醇诱导形成的大鼠肝纤维化的干预作用及其机制。方法：9O只雄性大鼠随机分为6组，分别为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱组(灌胃给予秋水仙碱1．0mg·kg·d)、异荭草苷低、中、高剂量组(灌胃给予异荭草苷25，

2、50，100mg·kg·d)。实验过程中，模型组大鼠仅灌胃给予白酒，治疗组在给白酒的同时灌胃相应的药物，正常组则只灌胃等量的生理盐水。给药24周后，各组大鼠眼球取血、取肝脏，并测定血浆白细胞介素-6(IL一6)，人肿瘤坏死『大】子一(TNF—OL)和清谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)，层粘连蛋白(LN)，Ⅲ型胶原(PCIII)和羟基脯氨酸(Hyp)的含量，检测肝组织髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活力

3、，Westernblot检测一平滑肌肌动蛋白(OL—SMA)和转化生长因子l(TGF-／31)的表达，以及肝组织病理检查。结果：异荭草苷能够保护受损的肝组织，降低ALT，AST，IL-6，TNF—O／，MDA，MPO，HA，LN，PCIII和Hyp的含量(P<0．05)，增强SOD，GSH—Px活性(P<0．05)，显著下调Ot—SMA，TGF1Bl的表达(P<0．05)，且中、高剂量组效果更为显著。结论：异荭草苷对酒精性肝纤维化大鼠具有保护作用。[关键词]满天旱；异荭草苷；乙醇；肝纤维化满天星Gypsophil

4、aelegansBieb，又名丝石竹、霞限公司，批号110403)。满天星异荭草苷的提取及草等，是石竹科石头花属植物。作者对满天星进行结构鉴定参考张凤梅等¨的方法，由本实验室自行了一系列的化学成分提取分离及其药效筛选研究，提取与鉴定。从其乙醇提取物中分离得到单体活性成分2”．O一一谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转L一阿拉伯糖异荭草苷，并通过实验研究，观察其对肝移酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶纤维化大鼠的影响，探讨满天星异荭草苷对乙醇诱(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)、羟基

5、脯氨导大鼠肝纤维化的保护作用机制。酸(Hyp)试剂盒(南京建成生物工程研究所)；白细1材料胞介素-6(IL-6)、人肿瘤坏死因子一(TNF一)试剂盒1．1动物雄性Wistar大鼠，SPF级，体重(2004-(武汉博士德生物工程有限公司)；透明质酸(HA)，2O)g，由广西医科大学实验动物中心提供，实验动层粘连蛋白(LN)，llI型胶原(PCIII)试剂盒(北京福物生产许可证号SCXK(桂)2009~003。瑞生物工程研究公司)；鼠单克隆抗体(美国Santa1．2药物和试剂满天星采白广西南宁市邕宁县，CruzBio

6、technology)；山羊抗小鼠一IgG抗体(美国经广西中医药大学第一附属医院药学部黄权芳副主CalbiochemCompany)；Westernblot检测试剂盒(美任中药师鉴定；秋水仙碱(厦门星隆达化学试剂有国Amersham)；TGF-／31一抗、羊抗兔．IgG抗体(武汉博士德生物工程有限公司)。2方法[收稿日期]2013．o682．1动物造模及分组给药90只雄性大鼠适应性[基金项目]国家自然科学基金项目(81260674)[通信作者]书锦斌，副教授，硕士生导师，Tel：(0771)5316851饲养1周

7、后，随机分为6组，每组15只，分别为正常E—mail：jbwei@sina．cn对照组、模型对照组、秋水仙碱(阳性对照)组、异荭[作者简介]陈永欣，硕士研究生，Tel：(077I)5358342，E-mail：cai"草苷低、中、高剂量组。除正常对照组外，其余5组()lchPn88I1@163“，m均灌胃给予乙醇以造成酒精性肝纤维化模型，给予·3726·第38卷第21期2013年11月"：勰!~China圈JournI中ofChn药esea杂teria畚edicaVoN1o．v3e8m，bIsesru，e2021

8、31的浓度和剂量采用逐渐递增的方法：l～4周，5．0比值。g·kg～·d～；5—8周，7．0g·kg～·d～；9～122．7肝组织中TGF-／31的检测分别取各组50mg周，9．0g·kg～·d～；l3～24周，9．5g·kg～·肝组织，加1mL蛋白裂解液(裂解液组成：50mmold～。在造模过程中，秋水仙碱组每天灌胃给予秋水·L一Tris，150mmol·L一NaC1，