裸鼹鼠肝脏显微结构与超微结构观察.pdf

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1、Oct．2013，33(5)实验动物与比较医学LaboratoryAnimalandComparativeMedicine373doi：10·3969／j·issn·1674-5817·2013·05·011·裸鼹鼠研究专题·裸鼹鼠肝脏显微结构与超微结构观察袁子彦，赵懿宁，张璐t，赵善民17林丽芳·，汤球，孙伟，余琛琳·，蔡丽萍，徐晨，崔淑芳(1．第二军医大学实验动物中·心，上海200433；2．上海市杨浦区精神卫生中心，上海200090)[摘要】目的观察和分析裸鼹鼠肝脏的形态结构与组成。方法采集裸鼹鼠肝脏经石蜡切片

2、和苏木精一伊红染色，光学显微镜下观察裸鼹鼠肝脏的显微结构，以及经冰冻超薄切片和染色后，通过透射电镜观察和分析裸鼹鼠肝脏脏的超微结构。结果光镜观察发现裸鼹鼠肝脏血管管腔直径较大，而且血管数量丰富；肝细胞体积略大，胞质中没有聚集成簇的糖原成分，肝细胞成索状分布，其间血窦非常丰富，而胆管不发达；透射电镜观察发现裸鼹鼠肝细胞处于旺盛的细胞合成阶段，线粒体和内质网数量丰富，糖原含量较少，溶酶体和自噬体也很丰富。结论裸鼹鼠肝脏具有旺盛的代谢功能、解毒能力、以及自我降解受损蛋白和细胞器的能力。【关键字】裸鼹鼠；肝脏；显微结构：超微

3、结构；功能[中图分类号]Q95—33【文献标识码】A【文章编号】1674—5817(2013)05—0373—05裸鼹鼠是一种生活于南非肯尼亚等地区的掘地海斯莱克实验动物有限责任公司『SCXK(沪)2008—类哺乳动物，在长期进化过程中形成了一系列适应0016]，清洁级设施中适应性饲养24h。地洞生活的特殊形态结构【l1扪。裸鼹鼠终生生活于1．2光学显微镜样品制备与观察地下封闭的洞道中，为了获取食物和繁衍后代，动物经体积分数0．3％戊巴比妥钠腹腔注射麻裸鼹鼠需要进行持续的挖掘活动，以持久的耐力性醉，打开腹腔，取肝脏，

4、迅速置于浓度为4．O％的中性运动为主【31，而其他在地面生活的动物，为了逃脱甲醛4℃固定24h。随后用低浓度到高浓度酒精作天敌进行采食，必须要有快速奔跑的能力，以短脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块暂的快速运动为主，因此生活习性的不同导致裸鼹置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透鼠代谢器官及代谢活动必将发生一些适应性变化。明，以二甲苯替换出组织块的中酒精。将己透明本文借助光学显微镜和透射显微镜对裸鼹鼠肝脏这的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。些适应性变化进行初步探索。待石蜡完全浸入组织块后进行包

5、埋，倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。1材料与方法冷却凝固成块即成。将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成5帅厚的薄片，贴到载玻片上，放45℃恒1．1实验动物温箱中烘干。然后再依次经苏木精水染色，酸水选择9月龄健康裸鼹鼠，共lO只，雌雄各半，及氨水中分色，流水冲洗，70％和90％酒精脱水，伊由本实验动物中心饲养于清洁级设施中；8周龄红染色等过程对组织进行染色。最后再用酒精脱水C57BL／6J小鼠，共10只，雌性各半，购买于上和二甲苯透明，用树脂封片即可。制备好的肝脏组织切片用光学显微镜进行观察，并做好

6、记录。女稿日期】2013—07—151-3透射电子显微镜样品制备与观察【基金项目】上海市科技发展基金项目(No．11140901700)与(No．12140900200)联合资助将组织块置于培养皿中，滴入体积分数2．5％【作者简介】袁子彦(1984一)，女，硕士，助教，戊二醛磷酸缓冲液充分浸润，用双面刀片将组织修成E—mail：yuanziyanyy@163．com1mlTl3小块，2．5％戊二醛前固定，经0．1mol／L磷酸缓【通讯作者】崔淑芳，教授，E—mail：youngstar_sf@163．com冲液漂洗后

7、，用1％OSO4后固定1h。接着0．1mol／L376实验动物与比较医学LaboratoryAnimalandComparativeMedicine分布着肝糖原和少量脂滴(图2B)。明，糖原颗粒有。颗粒及13颗粒，前者旱花簇状肝血窦：血窦是一种特殊的毛细血管，密集分糖粒分布，后者则均匀的散落在细胞质中[6,71，而布于肝板之间。肝血窦壁主要由血窦内皮细胞构糖原经苏木精一伊红染色后并不着色，因此小鼠肝成。内皮细胞核较大多呈纺锤体形，占据了细胞细胞在粉红色胞质中有成簇白色区域出现，即小鼠大部分体积，核内染色较深的异染色质

8、散落核内膜为0c糖原，而裸鼹鼠细胞的糖原则为均匀分布的B上；胞质和细胞器较少(图2C)。血窦内有大量巨噬糖原，致使胞质染色较小鼠浅。细胞存在，胞核较大，呈马蹄形，胞质因嗜酸性超微结构显示，裸鼹鼠肝细排列紧密，细胞而染色较深，内含发达的溶酶体，并常见吞噬体和吞间隙少。大部分肝细胞为单核，少数为双核，核饮泡，胞膜表面有大量皱褶和微绒毛。除此之外，仁