类泛素化蛋白酶1基因的表达与肝癌细胞株侵袭转移的关系.pdf

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1、中国肿瘤生物治疗杂志http：／／www．biother．orgChinJCancerBiother，Jun．2014，Vo1．21，No．3·309·doi：10．3872／j．issn．1007-385X．2014．03．013·基础研究·类泛素化蛋白酶1基因的表达与肝癌细胞株侵袭转移的关系刘延，李湘骇，杨定华(1．贵州省人民医院肝胆外科，贵州贵阳550000；2．南方医科大学南方医院肝胆外科，广东广州510515)[摘要]目的：研究类泛素化蛋白酶一1(sentrin．specificprotease．1，艇M，一)基因在不同侵袭潜能肝细胞肝癌细胞株及人

2、永生化肝细胞中mRNA和蛋白的表达水平及其与肝癌细胞侵袭能力的关系。方法：使用RT—PCR、Real—timePCR、Westernblot—ring和免疫荧光方法对肝癌细胞株MHCC97L(低侵袭性)、MHCC97H和HCCLM3(高侵袭性)、SMMC-7721和HepG2(无明显侵袭性)SENP—JmRNA和蛋白表达水平进行检测，以人永生化肝细胞株HL-7702为对照，分析SENP—的表达与肝癌细胞株侵袭转移能力的关系。结果：RT-PCR和Real—timePCR检测结果显示，SENP-1mRNA(F：5．658；P=0．042)和蛋白(F=88．909

3、，P=0．000)在肝癌细胞株中的表达随着肝癌细胞株侵袭潜能的增高而增高；Westernblotting检测结果显示，5种肝癌细胞株SENP-1蛋白水平均显著高于人永生化肝细胞株；免疫荧光法观察发现，SENP一1蛋白在肝癌细胞株内主要为胞质表达，部分胞核表达。结论：SENP—J基因在肝癌细胞株中的高表达可能具有促进肝癌细胞侵袭转移的作用。[关键词]类泛素化蛋白酶-1基因；肝细胞癌；侵袭；转移[中图分类号]R735．7；R730．2[文献标志码]A[文章编号]1007-385X(2014)03-0309-05Levelsofsentrinspecific-pr

4、otease-1mRNAandproteininhepatocellularcarcinomacellswithdiferentinvasiveandmetastaticcapacitiesLiuYan，LiXianghong，YangDinghua(1．DepartmentofHepatobiliarySurgery，GuizhouProvincialPeople’sHospi—tal，Guiyang550000，Guizhou，China；2．DepartmentofHepatobiliarySurgery，NanfangHospitalAffiliat

5、edtoSouthernMedicalUniversity，Guangzhou510515，Guangdong，China)[Abstract]Objective：TodeterminemRNAandproteinlevelsofsentrin—specificprotease1(一1)inhumannon—tumorhepaticcellsandvarioustypesofhumanhepatocellularcarcinoma(HCC)cellswithdifferentinvasiveandmetastat—iccapacities．Methods：L

6、owinvasiveHCCcell1inesMHCC97L，highinvasiveHCCcel11inesMHCC97HandHCCLM3，non．invasiveHCCcelllinesSMMC-7721andHepG2andimmortalizednormallivercelllineHL-7702wereutilized．TheirlevelsofsENP一1mRNAandproteinweredeterminedbyRTeRandquantitativereal—timePCRandWesternblottingre—spectivelywhile

7、theintracellularlocationofSENP．1assessedbyimmunofluorescencestaining．Results：RT—PCRandreal—timePCRanalysesshowedthatSEⅣP．1mRNAabundancewassignificantlydifferentbetweenthecel1linesevaluated(F=5．658；P=0．042)andincreasedwiththeincisivecapacityofthecells．protein(F=88．909，P=0．000)inHCCc

8、elllineswereincreasedsigni