鸟巢蕨的组培快繁技术-论文.pdf

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1、渺江雇千学2014年第7期圆文献著录格式：潘晓韵，沈晓岚，朱开元，等．鸟巢蕨的组培快繁技术[J]．浙江农业科学，2014(7)：1049—1050，1053鸟巢蕨的组培快繁技术潘晓韵，沈晓岚，朱开元，刘慧春，邹清成(浙江省萧山棉麻研究所，浙江萧山311202)摘要：以背面带有褐色孢子的鸟巢蕨叶片为外植体，通过孢子萌发途径组培快繁鸟巢蕨。扩繁数量不大时，可全程采用1／2MS+Ac1g·L培养基。在原叶体生长阶段需要原叶体达到一定的数量和密集程度时配子间才有较大可能结合产生孢子体，一般原叶体层厚度需达0．5～1cm才有孢子体长出。孢子

2、体增殖阶段在MS培养基中加入6-BA能诱导植株产生GGB，通过GGB途径进行增殖，GGB在不含或含有低浓度NAA，IBA的培养基上易分化成苗。关键词：鸟巢蕨；组织培养；原叶体；孢子体；GGB中图分类号：S682．35文献标志码：B文章编号：0528—9017(2014)07一1049-02鸟巢蕨(Aspleniumnidus)为铁角蕨科巢蕨属培养基加蔗糖20g·L。。，琼脂均为5g·L～，pH植物，主要分布于亚洲、非洲和澳洲，为多年生常为5．8，AC为活性炭(表1)。绿附生植物。叶丛生，向四周辐射状排列，呈鸟巢表1鸟巢蕨组培各阶段

3、培养基配方状。鸟巢蕨耐阴性强，较耐低温，病虫害少，管理简便，可连续多年栽培，作室内观叶布景及切叶栽培。近年来被用作高档叶菜栽培，因栽培期间无需喷施农药，嫩叶炒食质脆爽口，无苦涩味，颇受喜爱，成为道地的原生蔬菜。鸟巢蕨主要靠孢子繁殖，但繁殖要求条件高，自然条件下难以萌发。组织培养可以在短期内获得大量种苗，进行规模化生产。l材料与方法1．1材料以背面带褐色孢子的鸟巢蕨叶为试材。1．2方法1．2．1无菌材料的获得叶片经流水冲洗1h后，用70％酒精浸泡20—30s，用无菌水冲洗后，在0．1％升汞中浸泡8～10min，再用无菌水冲洗并吸干水

4、分后，切成0．5～1cm见方的小块，接种于孢子萌发培养1．2．4其他处理基上。在原叶体生长阶段的B1～B4各取6瓶加数滴1．2．2培养条件无菌水，其中各取3瓶每周摇晃1次，持续2个培养温度为20～25℃，光强2000lx，光照时月，另3瓶静置。B1～B4各6瓶不加无菌水为间10h·d～。对照。1．2．3培养基将B2上1～1．5cm的鸟巢蕨小苗分别接人MS培养基加蔗糖30g·L～，1／2MS和2／3MSD1～D6培养基，每瓶4株，每种培养基8瓶，45d收稿日期：2014-02．28作者简介：潘晓韵(1967一)，女，浙江萧山人，助理

5、研究员，从事花卉组培与育种研究工作。E-mail：panxy06@163．tom。田雹渺江学J-：学2014年第7期转接1次，3个月后统计根数，测量每株最长4根加而增加，体积随6．BA浓度增加而变小，孢子体的根长，计算平均值。变厚变硬、叶卷曲皱缩。总体表现与先前他人的试验结果类似。在c1～c5培养基上，GGB都能2结果与分析不断增殖。但GGB在c1，c2上能长出孢子体植2．1孢子的萌发株，在C3～C5上则长期以GGB的形态存在。带孢子叶在A1，A2培养基上经过1个月左右的培养，孢子萌发，可见许多绿色小点，即原叶体。无论叶面或叶背朝

6、上，孢子均能萌发。2．2原叶体生长及孢子体形成原叶体在不加6一BA的B1，B2培养基上生长一快，颜色鲜绿；在培养基B3，B4上的则逐渐变黄，生出许多绒毛；在培养基B3上尚有缓慢生图1孢子体诱导产生GGB和壮苗促根长，在B4中生长停滞，几个月后变成内核坚硬的绒球。说明6一BA不利于原叶体的生长，浓度越高2．4孢子体壮苗和促根抑制越强。NAA对原叶体生长无明显促进作GGB转入D1～D6培养基后迅速长成孢子体植用。当B3，B4培养基上的原叶体转入B1，B2培株(图1)。在D1～D6接人大小一致的鸟巢蕨已养基后，很快恢复生长。生根小苗进行

7、生根培养基试验，结果见表2。在前7个月中，不论有无添加无菌水及是否晃表2不同培养基对鸟巢蕨生根的影响动培养瓶，原叶体在4种培养基上都无孢子体产生。第8个月在B1，B2培养基中可见少量孢子体，培养基B3，B4上原叶体始终未见孢子体产生，转入B1，B2培养基一段时间后才可见孢子体萌出。培养前期的4种培养基，不论有无加入无菌水的培养瓶，定期晃动和静置的都无孢子体萌出，说明在原叶体数量较少、分布分散的情况下，为扩大不同生根培养基处理间的鸟巢蕨根数无显著差配子的活动范围，促进配子间的结合，采取添加无异。根长D6显著长于D3，极显著长于D5，

8、D2，菌水和晃动培养瓶的措施是无效的。D4，D1显著长于D4，说明活性炭、NAA、IBA主第8个月在B1，B2培养基上原叶体已长成要影响鸟巢蕨根的长度，对根的数量无显著影响。0．5—1cm的厚层，而B3的原叶体尚未填满接种随着IBA，NAA浓度增加