小鼠仙台病毒ELISA抗体检测规范化试剂盒的研制与应用.pdf

《小鼠仙台病毒ELISA抗体检测规范化试剂盒的研制与应用.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、2012年11月中国比较医学杂志November，2012第22卷第11期CHINESEJOURNALOFCOMPARATIVEMEDICINEV0l_22No．11小鼠仙台病毒ELISA抗体检测规范化试剂盒的研制与应用向志光，佟巍，刘先菊，张丽芳，李雨函，王艳蓉，刘云波，魏强(中国医学科学院，北京协和医学院，医学实验动物研究所，卫生部实验动物检测中心，北京100021)【摘要】目的按照实验动物国家标准和农业部对于兽医诊断制品的要求研制小鼠仙台病毒抗体检测试剂盒，并在临床检测中分析其适用性。方法建立仙台病毒的种子批和BHK一21细胞

2、的细胞库；标化仙台病毒生产工艺、抗原蛋白纯化工艺；优化ELISA反应板体系；标化质控血清。使用规范化的ELISA试剂盒对我单位672份送检血清样品进行检测，使用IFA和Westernblot方法进行复检。结果病毒的种子批检验表明在一80~C保存半年以上毒力稳定；病毒生产和抗原纯化工艺的标准化提高了抗原生产的稳定性；对照体系的设定降低了环境等变量对于结果判定的影响。在对临床样本的检测过程中发现3种方法的灵敏度ELISA高于Westernblot高于IFA。结论规范化的小鼠仙台病毒ELISA抗体检测试剂盒能对小鼠仙台病毒感染状况作出准确

3、判断，具有一定的稳定性和结果可重复性。【关键词】小鼠；仙台病毒；ELISA；规范化【中图分类号】R一332【文献标识码】A【文章编号】1671—7856(2012)11-0041．05doi：10．3969．i．issn．1671．7856．2012．011．009TheDevelopmentandApplicationofStandardizedELISAKitforMouseSendaiVirusXIANGZhi—guang，TONGWei，LIUXian-ju，ZHANGLi—fang，LIYu—han，WANGYan—ron

4、g，LIUYun-bo，WEIQiang(KeyLaboratoryofHumanDiseasesComparativeMedicine，MinistryofHealth；InstituteofMedicalLaboratoryAnimalScience，ChineseAcademyofMedicalSciences，LaboratoryAnimalMonitoringCenter，MinistryofHealth，Beijing100021，China)【Abstract】0bjectiveTodevelopastandardiz

5、edELISAkitformouseSendaivirusandtestitinclinicalapplication．MethodsSendaivirusseedbatchesandBHK-2lcellbankSweresetfirstly：thenthecraftsforvirusproductionandantigenpurificationwereestablished；thedetectionsysteminELISAflatwasalsooptimized；thepositiveandnegativeserumcontr

6、olswerenormalized．Atotally672serasampleswereanalyzedbythecurrentELISAkit，andtheresultswereconfirmedbyIFAandWesternblot．ResultsTheSendaivirusseedbatchesstoredat一80~Cwerestableformorethan6months；thevirusproductioncraftandantigenpurificationcraftimprovedtheantigenquality；

7、thecontrolsystemsreducedtheeffectsfromenvironment．ThedetectionsensitivityofELISAkitishigherthanWesternblot，muchhigherthanIFA．Conclusi0nThestandardizedmouseSendaivirusdetectionELISAkitcandetecttheSendaivirusinfectioncondition．andthedetectionresultisstableandreproducible

8、．【Keywords】Mouse；Sendaivirus；ELISA；Standardized[基金项目1中央级公益性科研院所基本科研业务费专项基金项目(DWS201213)。[通讯作者】魏强，Email：weiqiang0430@s