香烟烟雾提取物通过氧化应激下调组蛋白去乙酰化酶2诱导小鼠骨骼肌细胞早衰.pdf

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1、630细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolhnmuno1)2015，31(5·论著·文章编号：1007—8738(2015)05—0630—04香烟烟雾提取物通过氧化应激下调组蛋白去乙酰化酶2诱导小鼠骨骼肌细胞早衰刘文婷，苏文燕，杨霞，白晶，钟小宁，何志义(广西医科大学第一附属医院呼吸内科，广西南宁530021)[摘要]目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)是否通过氧化应激减少抗衰老分子组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的表达而诱导骨骼肌细胞早衰。方法诱导C2C12成肌细胞分化成骨骼肌细胞，观察CSE处理对骨骼肌细胞氧化应激、衰老和HDAC2表达的影响，应用氧化剂

2、H：0：和抗氧化剂N．乙酰半胱氨酸(NAC)为工具药，检测细胞中丙二醛(MDA)含量、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—P】【)活性的变化，应用B半乳糖苷酶染色检测衰老细胞百分率，采用实时荧光定量PCR检测HDAC2mRNA水平，Westernblot法检测HDAC2蛋白水平。结果与对照组相比，CSE和HO2可增加小鼠骨骼肌细胞MDA含量和ROS水平，而降低SOD、GSH-Px的活性，同时伴有B半乳糖苷酶的水平增加和抗衰老分子HDAC2mRNA和蛋白水平的降低。NAC预处理后，可降低CSE诱导的MDA含量和ROS活性，提高SOD

3、、GSH．Px的活性，同时B半乳糖苷酶表达降低，HDAC2的水平升高。结论CSE可能是通过氧化应激降低HDAC2诱导小鼠骨骼肌细胞早衰。[关键词]氧化应激；衰老；香烟提取物；组蛋白去乙酰化酶2；慢性阻塞性肺疾病[中图分类号]R392-33，R563【文献标志码]ACigarettesmokeextractinducessenescenceofmurineskeletalmusclecellsbyoxidativestress-induceddown-regulationofhistonedeacetylase2LIUWenting，suWenyan，YANGXia，

4、BAIJing，ZHONGXiaoning，HEZhiyiDepartmentofRespiratoryMedicine，FirstAffiliatedHospital，GuangxiMedicalUniversity，Nanning530021，China【AbstractJObjectiveToinvestigatewhethercigarettesmokeextract(CSE)inducesthesenescenceofskeletalmusclecellsbyoxidativestross．induceddown-regulationofhistonede

5、acetylase2(HDAC2)．MethodsC2C12myoblastswereinducedtodiferentiateintoskeletalmusclecells．H2O2andN-acetylcysteine(NAC)wereusedtoinvestigatetheefectsofCSEonoxidativestress．colIsenescenceandtheexpressionofHDAC2inskeletaImusclecels，anddotectthechangesoftheactivitiesofmalondialdehyde(MDA)，su

6、peroxidedismutase(SOD)，reactiveoxygenspecies(ROS)andglutathioneperoxidase(GSH-Px)．Celsenescencewasidentifiedbysenescence-associated13-galactosidasestaining．TheexpressionsofHDAC2mRNAandproteinweremeasuredbyreal-timequantitativePCRandWesternblotting．respectively．ResultsComparedwiththecon

7、trolgroup，MDAconcentrationandROSactivitysignificantlyincreased，theactivitiesofSODandGSH-Pxsignificantlydecreased，theexpressionofp-galactosidasewasup-regulated，andtheexpressionsofHDAC2mRNAandproteinweredown-regulatedintheCSEgroupandtheH2O2group．However，thechangesintheCSEgroupwererever