蜕皮甾酮对脂多糖诱导兔软骨细胞损伤的保护作用.pdf

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1、天津医药2015年6月第43卷第6期587蜕皮甾酮对脂多糖诱导兔软骨细胞损伤的保护作用王刚涛，张旭辉，张卫东，夏磊摘要：目的探讨蜕皮甾酮(EDS)对脂多糖(LPS)诱导的兔软骨细胞损伤的保护作用及其机制。方法体外分离、培养兔关节软骨细胞，随机分为对照组、LPS诱导损伤组(LPS组)，蜕皮甾酮干预组(LPS+EDS组)。Mrrr法和流式细胞术分别检测各组细胞增殖率及细胞凋亡率；RT—PCR和Westernblot检测软骨细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达；硝酸还原酶法和ELISA法分别检测各组NO及白细胞介素(IL)一113#量。结果与对照组相比，LPS组细胞增殖率降低，凋

2、亡率升高，iNOSmRNA和蛋白表达量以及NO和IL一1B含量增高f均P<0．05)。LPS+EDS组较LPS组细胞增殖率升高，凋亡率降低，iNOSmRNA和蛋白表达量及NO和IL一1B的含量降低(均P<0．05)。结论蜕皮甾酮对LPS诱导的兔软骨细胞损伤具有保护作用，其保护作用可能与抑制iNOS表达有关。关键词：蜕皮甾酮；软骨细胞；脂多糖类；细胞增殖；细胞凋亡；白细胞介素113；诱导型一氧化氮合酶中图分类号：R684_3文献标志码：ADoI：10．11958／j．issn．0253—9896．2015．06．003Protectiveefectofecdysteroneonr

3、abbitschondrocytesthatisinjuredbylipopoIysaccharideWANGGangtao，ZHANGXuhui，ZHANGWeidong，XIALeiDepartmentofjointsurgery,the371CenterHospitalofThePLA．Xinxiang453000,ChinaCorrespondingAuthorE—mail：xuhuiz@163．cornAbstract：0bjectiveTostudytheeffectofecdysterone(EDS)onrabbitschondrocytesthatisinjur

4、iedbylipopolysac—eharide(LPS)．MethodsAricularchondrocyteswereisolatedfromrabbitsandrandomlydividedintothreegroups：controlgroup；chondrocyteswithLPSinducedinjury(LPSgroup)；injurychondrocytestreatedwithEDS(LPS+EDSgroup)．ThecellproliferationandcellapoptosisofchondrocytesweredeterminedbyMTTmethod

5、andflowcytometryassayrespectively．ThemRNAandproteinexpressionlevelsofinduciblenitricoxidesynthase(iNOS)weredetectedbyRT—PCRandwesternblot．tnaddition，thecontentofNOandIL一113weremeasuredbynitricacidreductaseassayandenzyme—linkedimmunosorbentassay(ELISA)respectively．ResultsAttenuatedproliferati

6、on，increasedcellapoptosis，iNOS，NOandIL一1wereseeninLPSgroup．butallthesechangesweresignificantlyreversedbyEDStreatmentfP<0．05)．ConclusionEcdysteroneexhib—itedaprotectiveeffectonLPSinducedrabbitschondrocytesinjurythroughinhibitingtheexpressionofiNOS．Keywords：Ecdysterone；chondrocytes；1ipopolysac

7、charides；cellproliferation；apoptosis；interleukin—lbeta；iNOS软骨损伤是导致骨关节炎发生的重要因素n。购于Gibco公司。AV／PI双染凋亡检测试剂盒购于BD公目前骨关节炎治疗多用西药，疗效不明显且不良反司；NO检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所；兔白细胞介素(IL)一1BELISA检测试剂盒购于R&DSystems公司；羊应较多，近年来中药治疗骨关节炎因其不良反应少抗兔诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和B—actin一抗、辣根过氧而成