黄瓜绿斑驳花叶病毒磁免疫层析试纸条的研制-论文.pdf

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1、艋扬佩2014，40(3)：113116PlantProtection黄瓜绿斑驳花叶病毒磁免疫层析试纸条的研制魏梅生，李桂芬，马洁，朱水芳，王军平，文朝慧(1．中国检验检疫科学研究院植物检疫研究所，北京100029；2．甘肃出入境检验检疫局，兰州730020)摘要用磁性纳米颗粒标记黄瓜绿斑驳花叶病毒的兔多克隆抗体建立了简便快速的磁免疫层析试纸条检测方法。该方法检测提纯病毒的灵敏度为0．1~g／rnL，检测葫芦病汁液可稀释10000倍(重量／体积)。试纸条和黄瓜绿斑驳花叶病毒具有特异性反应，和同属的烟草花叶病毒、番茄花叶病毒、辣椒轻斑

2、驳病毒和齿兰环斑病毒，未出现交叉反应。该试纸条可用于田间病害检测和诊断。关键词黄瓜绿斑驳花叶病毒；磁免疫层析；试纸条中图分类号：S41文献标识码：AIX)l：10．3969／j．issn．0529—1542．2014．03．019MagneticimmunochromatographyassayforrapiddetectionofCucumbergreenmottlemosaicvirusWeiMeisheng，LiGuifen，MaJie，ZhuShuifang，WangJunping，WenZhaohui(1．Institut

3、eofPlantQuarantine，CAIQ，Beifing100029，China；2．GansuEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau，Lanzhou730020，China)AbstractRapidmagneticimmunochromatographyassayWasdevelopedbycouplingmagneticnanoparticleswithpoly—clonalrabbitantibodyagainstCucumbergreenmottlemosaicvirus(CG

4、MMV)．Sensitivityofthemethodwas0．1mLfordetectingpurifiedCGMMV．CGMMVcouldbedetectedintheextractoftheinfectedLagenariasicerarialeavesatadilutionof10(w／v)．TheimmunostripwasspecifictoCGMMV，withoutcrossreactionwithothertobamovirusessuchasTobaccomosaicvirus，7omatorru~icvirus，

5、PeppermildmottlevirusandOdontoglossumringspotvirus．TheilnlTlU—nostripisanidealscreeningtoolforfieldinspectionanddiseasediagnosis．KeywordsCucumbergreenmottlemosaicvirus；magneticimmunochromatographyassay；immunostrip黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumbergreenmottle疫处理措施，可避免病害的进一步扩散蔓延[4]。目mos

6、aicvirus，CGMMV)为烟草花叶病毒属(To—前，用于CGMMV快速检测方法主要是胶体金免疫bamovirus)成员，是全国农业植物检疫性有害生物层析法(goldimmunochromatographyassay，GI—和我国进境检疫性有害生物。CGMMV主要危害CA)，可在15min内得到检测的结果。胶体金免疫层葫芦科作物，引起植物叶片斑驳、系统性花叶等症析采用胶体金来标记特异性的检测抗体，利用胶体金状，造成产量和品质下降，对生产危害很大_1]。的呈色性用肉眼判别检测的结果，但胶体金结果的判该病毒分布于英国、以色列、西班牙

7、、希腊、沙特断有时会受到植物叶绿素的干扰。磁纳米颗粒(mag—阿拉伯、印度、巴基斯坦、韩国和日本等国家和地neticnanopartieles)是一种新型纳米材料，其核心是由区[2]。根据我国农业部公布的~2012年全国农业植物具有超顺磁性的(superparamagnetic)Fes04或铁磁性检疫性有害生物分布行政【)_￡名录》，国内辽宁、上海、的(ferromagnetic)T-Fez03组成。超顺磁性纳米材料江苏、浙江、安徽、湖北、湖南、广东、广西_3]、海南等10具有在外加磁场的作用下能迅速聚集，在无磁场的情个省(区、市)

8、59个县(市、区)有CGMMV的分布。况下能够均匀分散的特点，表面功能化的磁性纳米材早期诊断和发现田间CGMMV，采取有效的检料可用于蛋白质、DNA和RNA等生物大分子的纯收稿日期：2013—07—17修订日期：2013—08—21基