无偿献血者ELISA法筛查HIV反应性标本与免疫印迹法检测结果.pdf

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1、2015年3月A第2卷第7期临床医药文献杂志Mar．A2015、，01．2No．7JournalofClinicalMedicalLiterature1287无偿献血者ELISA法筛查HIV反应性标本与免疫印迹法检测结果李英辉，杨巍，王涛，杜艳丽，孙微超，刘彦哲(哈尔滨红十字中心血站，黑龙江哈尔滨150000)【摘要】目的对哈尔滨市无偿献血者中HIV抗体反应性的标本进行抗体蛋白印迹确认实验与酶联免疫法对比实验，通过实验结果分析探讨其应用特点。方法将本血液中心检验科2010年1月～2014年6月间ELISA法

2、检,~,IHIV结果呈反应性的911份标本重新进行抗体蛋白印迹确认与酶联免疫法对比实验。结果2010年1月～2014年6月来哈尔滨无偿献血者HIV抗体ELISA法与免疫印迹法的阳性符合率为18．2％，抗体不确定占41．7％。S／CO值大于O小于或等于1与确证试验阳性符合率为0％抗体不确定为29．4％，S／C0值>l≤2阳性符合率为O％抗体不确定53．8％，S／CO值>2≤3阳性符合率为62．9％抗体不确定为33．7％。结论随着ELISA法s／CO值的增高，与确证试验的阳性符合率也升高。考虑到血液的安全筛查试

3、验的灵敏度相对要高特异性低一些，存在一定假阳性结果，所以HIV抗体结果报告必须以WB结果为准。【关键词】无偿献血者；HIV抗体；蛋白印迹；酶联免疫【中图分类号】R446【文献标识码】B【文章编号】ISSN．2095—8242．2015．07．1287．02艾滋病即获得性免疫缺陷综合症，是由艾滋病毒感染所(37±1)℃9呼育60rain。用配好的洗液洗板(5次)。除空引起的，艾滋病毒又称为人类免疫缺乏病毒简称HIV，HIV白孔外每孔加酶100I．tL，(37±1)℃孵育30min。洗板(5主要破坏人体免疫系统

4、的CD4的T淋巴细胞，致使人体对周次)。每孔加入底物A、B各50，混匀后置(37±1)℃围环境中的病原微生物丧失抵抗能力，进而机体免疫监视功避光显色30rain。每孔加终止液50，混匀，置酶标仪用能下降，从而使人增加受感染和得一些恶性疾病的机会，可450nlTl波长测定各~：LOD值。并发严重的感染和肿瘤，最终导致感染者死亡l1]。我国AIDS1．3．2法国伯乐应用夹心两步法呈加速流行的趋势，截至N2oo2年底，我国实际HIV感染者酶联免疫技术检测人血清或血浆中HIV抗原~lHIV1、已超过100万。当前对

5、HIV感染还没有安全有效的治疗方法，HIV2相关的各种抗体，取出试剂盒放置室温约30rain，平衡HIV极高的突变率等原因又使研~r]HIV有效疫苗极为困难，至室温后打开自封袋，取用所需板。将浓缩洗涤液用蒸馏水所以目前防治的主要手段还是以预防为主[2】，艾滋病传播途或去离子水20倍稀释。每次实验设阴性对照3孔、阳性对照2径有三种：性传播，血液传播和母婴传播。输血是HIV经血孔、室内质控1孔。每孔加入结合物1(R6)25p．L各孔加入样液传播的重要途径之一，为降低经输血传播HIV的风险，品或对照品75。封板后

6、置(37±1)℃孵育60rain。用配对无偿献血者进行HIV检测是有效防范措施之一，保证临床好的洗液洗板(3次)。每~LlooI．tL的结合物2。血液安全，尽早发现HIV感染者，控制其传播。本文结合我室温下(22~26)℃孵育(30±2)rain。洗板(5次)。站2010年1月～2014年6月份HIV结果呈反应性的911份标本每孔分配80uL的底物，室温下(22~26)℃孵育(30±2)ELISA法与免疫印迹法确证试验检测结果进行相关探讨。rain。每孔分配终止液100gL，混匀，4rain后用450nm主

7、测波长和620ntn参考波长比色。1资料与方法结果判定：样品OD值S≥CO，判为HIV抗体初筛阳1．1一般资料性，s

8、V抗体初筛ELISA法试剂盒英科新创试剂购自厦门新pol(p31、p51、p66)带；HIV抗体阴性：没有病毒的创有限公司和法国伯乐试剂购自北京万泰生物技术有限公特异性条带或只检出P17抗体没有其他条带；HIV抗体司。爱康Xantus)JIl样仪奥斯JE[~Fame。不确定：出现任何病毒特异条带，但不足于被判断为阳1I3检测方法性。HIV-2抗体阳性：在HIV-1阳性或不确定基础上见如1-3．1英科新创采用双抗原