双抗原夹心法检测HIV抗体影响因素研究.pdf

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1、现代检验医学杂志第25卷第3期2010年5月JM0dLabMed，Vo1．25，No·3，May·21：)10115双抗原夹心法检测HIV抗体影响因素研究张桂芳(冀中能源峰峰集团有限公司总医院，河北邯郸056200)摘要：目的探讨双抗原夹心法检测HIV抗体的影响因素，提高HIV抗体检测质量。方法用双抗原夹心法检测HIV抗体，对同一样品进行不同血清(非溶血与溶血，非脂浊与脂浊)、不同孵育方式(37℃；枉浴与温育)、不同血清量(100I与5Oe1)、不同孵育时问(30rain与20min)、显色终止后不同时闻段比色对测定结果(以值)

2、的影响。结果非溶血与溶血稀释样品、非脂浊与脂浊稀释样品、两种孵育方式的配对t检验，P均>0．05；不同血清量、不同孵育时间的配对t检验·P均d0．05；加终止液后立即比色与5rain比色比较P>0．05，与10，15，2O，25，30min比较，P均d0．05结论溶血、脂浊样品、不同孵育方式对值影响较小；加血清量减少、孵育时间缩短A值减低，可能导致弱阳性标本漏检；加终止液后5rain以内比色结果比较理想，10min以上比色A值明显减低，与立即比色比较差异有统计学意义。关键词：HIV抗体；溶血；脂浊；孵育方式；血清量；孵育时间；显

3、色终止后比色时问中图分类号：R446．62文献标志码：A文章编号：1671—7414(2010)03—1]【5一O2doi：10．3969／i．issn．1671—7414．2010．03．040艾滋病(AIDS)是由免疫缺陷病毒(HIV)引起比稀释HIV抗体阳性血清，用于非脂浊与脂浊样的慢性传染病，特异性HIV抗体检测是诊断HIV品的比较，同时测定各样品的三酰甘油(以TG含感染的主要依据和有效途径。目前我国普遍采用双量表示脂血的严重程度)含量。抗原夹心法进行HIV抗体初筛检测]。双抗原夹1．2．4HIV抗体阳性样品的制备：取H

4、IV抗体阴心法为第三代EIIsA试剂，不仅包被抗原高度纯性样品若干份，离心分离血清，分别加入不同量的化，且采用重组和多肽相结合，大大提高了特异性，HIV抗体阳性血清，稀释成不同浓度的HIV抗体使漏检率明显下降，并可同时检测IgG，IgM抗阳性样品，进行不同孵育方式、不同血清量、不同孵体[3]。但抗体检测仍受多种因素影响，为提高检测育时间、显色终止后不同时间段比色的比较。质量，我们对溶血、脂浊样品、孵育方式、血清量、孵1．3统计学分析采用SPSS14．0软件进行统计育时间、加终止液后比色时间等对试验的影响进行学分析。所有结果(值)

5、之间的比对采用配对t检了研究分析。验，P

6、械厂)，电热恒温和脂浊倍比稀释样品的HIV抗体，两组值配对培养箱(上海新苗医疗器械制造有限公司)。t检验，t一0．597，尸一0．562，结果差异无统计学意1．2方法义。1．2．1样品来源：HIV抗体阴性样品来自本院健2．3不同孵育方式对HIV抗体检测的影响将康体检者；HIV抗体强阳性样品一份来自邯郸市12份HIV抗体阳性样品每份平行测定2孔(2疾控中心，经河北省疾控中心确认，56℃30min灭组)，一组孵育方式为37℃水浴箱，另一组孵育方活处理。式为37℃培养箱，其它操作条件相同，对两组值1．2．2非溶血、溶血稀释样品的制备：

7、取HⅣ抗进行配对t检验，￡一0．544，尸一0．597，结果差异无体阴性样品一份，分离非溶血血清和溶血(冻融法统计学意义。Hb15g／L)血清，用此血清倍比稀释(1：2，1：4⋯2．4不同血清量和不同孵育时间对HIV抗体检l：4096)HIV抗体阳性血清，用于非溶血与溶血测的影响将30份H1V抗体阳性样品每份平行样品的比较，同时测定溶血样品的Hh浓度。测定3孔(3组)，一组正常操作(血清100l，孵育1．2．3非脂浊、脂浊稀释样品的制备：用HIV抗30min)；一组血清5Ol、孵育30min；另一组血清体阴性的非脂浊、脂浊(TG

8、6．5mmol／L)血清倍100l，孵育20min，其它操作条件相同，测定作者简介：张桂芳(1964一)，女．本科，副主任技师，主要从事临床免疫学检验，Tel：13171858102，E．mailyz～doctor@163．com。116现代检验医学杂志第25卷