适用于蛋鸡免疫的猪源ETEC菌毛蛋白佐剂的筛选.pdf

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1、福建畜牧兽医第35卷第4期2013年1适用于蛋鸡免疫的猪源ETEC菌毛蛋白佐剂的筛选陈曦赵兴华俞伏松杨金先宋铁英(福建省农业科学院生物技术研究所福州350003)摘要为筛选卵黄抗体的优良佐剂，以3株猪源致病性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白为模式抗原，分别与6种佐剂制备多价菌毛蛋白疫苗，免疫海兰褐壳蛋鸡。结果显示，3次免疫后，所有试验组蛋鸡产蛋率均有不同程度下降，但SPA、ISCOMs、弗氏佐剂、蜂胶佐剂组的产蛋率下降程度较为轻微；对鸡体血清抗体和制备获得的卵黄抗体的效价检测结果均显示：SPA和ISCOMs组虽较SPB、SPC、弗氏佐剂组抗体水平略低，但持久度较好

2、，且通过对蛋鸡外观形态和注射部位组织变化情况的观察显示，两者不会刺激鸡体热反应或炎症反应，无任何表观副作用。因此，更适合作为蛋鸡制备猪源ETEC卵黄抗体的优良佐剂。关键词免疫佐剂猪源ETEC菌毛蛋白(K88、K99和987P)产蛋率卵黄抗体炎症反应文献标识码：A文章编号：1003—4331(2013)04—0001—05TheScreeningofAdjuvantApplicableforPig-originalETECPilyforEggYolkAntibodyProductionChenXiZhaoXinghuaYuFusongYangJinxianSon

3、gTieying(BiotechnologyInstitute，FujianAcademyofAgriculturalSciences，Fuzhou350o03)AbstractimmunologicadjuvantsweremixedwithETEC(K88，K99，and987P)modelantigensandusedtostimulateHy-lineVarietyBrownhentoproduceeggyolkantibodies．TheresultsshowedthattheeggproductionsofGroupSPA，ISCOMs，FA(Fr

4、eund’sadju-vant)，andPropolisdreasedlowerthantheothergroups．AndGroupSPAandISCOMsdidnotshowanyheatingreactionorinflamma-tionaftertheinjectionimmunityalthoughthetilersofserumandeggyolkantibodiesofthemwereslightlylowerthanGroupSPB，SPCandFA．ThuswecametoaconclusionthatGroupSPAandISCOMswer

5、ebettertobedevelopedaspotentialadjuvatsforeggyolkan—tibodiesproduction．KeywordsImmunologicadjuvantsPig-originalETEC(K88，K99and987P)LayingrateEggyoldantibodyInflammation卵黄抗体(IgY)是一类在禽类受精卵卵黄中富对蛋鸡的产蛋率和正常生理功能的影响，本文以猪集的，针对特定抗原的具有较强免疫功能的球蛋白源ETEC菌毛蛋白(K88、K99和987P混合菌)为模[．-。与常用的产生于哺乳动物血清中的Ig

6、G抗体相式抗原，分别与6个类型的佐剂制备多价菌毛蛋白比，卵黄抗体具有自身独特的优势，这给卵黄抗体在疫苗，并分析不同佐剂的疫苗在诱导蛋鸡产生血清畜禽疾病的防治、诊断试剂的开发、饲料添加的使用抗体和卵黄抗体的差异性及对产蛋率和生理性状变乃至于人类疾病的治疗方面的应用带来了发展的潜化情况的影响，为筛选蛋鸡产蛋期间使用的安全、高力和契杌z-。效的免疫佐剂，建立规范化的蛋鸡卵黄抗体的制备由于蛋鸡在产蛋期间进行免疫会导致产蛋率下工艺打下基础。降，并造成蛋鸡的器官及注射组织产生病理损伤、从1材料与方法而影响摄食甚至过度应激导致死亡等副作用[3]，因1．1抗原制备试验所使用的

7、猪源ETECK88、此通常情况下蛋鸡的预防性免疫在开始产蛋前基本K99和987P菌株均由本实验室细菌库分离和保完成。但在卵黄抗体的制备流程中，为在产蛋期间持存。各菌株分别经过复苏和培养后，参考汪家政等司续稳定获得高效价抗体，需要在开产后进行定期超的方法进行菌毛蛋白的提取、纯化及SDS—PAGE电引，因此，筛选诱导效价高而且对鸡体伤害小的免泳检测，并进行蛋白浓度的定量后，置于一20℃下保疫佐剂，就成为决定影响卵黄抗体大规模生产和应存备用。用的关键性因素。1-2不同佐剂疫苗的制备和免疫为了尝试解决这一问题，降低抗体制备过程中1．2．1免疫佐剂SPA佐剂(纳米水溶性

8、)、SPB佐剂(水包油包水型)和SPC