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时间:2017-12-18
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1、缩宫素对小鼠离体子宫的影响摘要实验目的:学习离体子宫平滑肌运动的描记方法;观察缩宫素对离体子宫的兴奋作用,并了解其临床意义。实验原理:缩宫素直接兴奋子宫平滑肌,加强其收缩。小剂量加强子宫(特别是妊娠末期的子宫)的节律性收缩,使收缩振幅加大,张力稍增加,其收缩的性质与正常分娩相似,即使子宫底部肌肉发生节律性收缩,又使子宫颈平滑肌松弛,以促进胚胎娩出。随着剂量加大,将引起肌张力持续增高,最后可致强直性收缩。实验方法:制备小鼠离体子宫平滑肌标本,连接好标本和压力传感器后,分别给予用低浓度0.02U/ml和
2、高浓度2U/ml的缩宫素200μl,观察子宫平滑肌的张力变化。实验结果:低浓度的缩宫素对子宫平滑肌的主要作用为收缩力增强,收缩频率增快,不产生强直收缩;高浓度的缩宫素对子宫平滑肌的作用为使子宫产生强直收缩。关键词:缩宫素;药理作用1前言缩宫素,是垂体后叶激素的主要成分,先在下丘脑的视上核与室旁核的神经元内合成,然后与载体后叶激素运载蛋白结合成为复合体。此复合体含于分泌颗粒中,沿神经轴突(下丘脑-垂体束)以每日约3mm速度转运至垂体;缩宫素在转运途中,前激素转化为九肽的缩宫素或加压素,然后贮存在神经末
3、梢,当神经冲动到达时即被释放,通过毛细血管进入血液循环到达远端器官而发挥作用。缩宫素能直接兴奋子宫平滑肌,加强其收缩。小剂量加强子宫(特别是妊娠末期的子宫)的节律性收缩,使收缩振幅加大,张力稍增加,其收缩的性质与正常分娩相似,即使子宫底部肌肉发生节律性收缩,又使子宫颈平滑肌松弛,以促进胚胎娩出。随着剂量加大,将引起肌张力持续增高,最后可致强直性收缩,这对胚胎和母体都是不利的,临床上用于缓解子宫的大出血。2实验部分2.1实验动物、药品及器材未孕雌性小鼠药品:0.2U/ml,2U/ml的缩宫素溶液各5m
4、l,乐氏液器材:标本夹,固定架,铁支架,肌张力传感器,生物信号分析系统,10ml注射器,1ml注射器,黑色细线,培养皿,常规手术器械,恒温装置,供氧系统(提供95%O2与5%CO2的混合气体。)2.2实验方法2.2.1离体子宫标本制备:取处于动情期的雌性大鼠(实验前2日ip已烯雌酚注射液0.5ml/只,可促使其进入动情期),每组1只,脱颈椎处死后剪开腹腔,找出子宫,轻轻剥离;在子宫二角相连处下端剪断,取出子宫,置于有营养液的培养皿内。2.2.2连接装置:将子宫二角相连处剪开,取一角,剪取2cm,一端
5、用标本钩钩上固定在浴槽底部,另一端用线用标本钩钩上固定在浴槽底部,另一端用线结扎与传感器相连。浴槽的营养液以能浸没子宫为宜。水浴温度为37±0.5℃,静置15min,待子宫适应后,开始实验。2.2.3调节仪器:打开BL-420F生物机能实验系统,开始实验。正常曲线张力调至1g左右,稳定后,记录30min的肌张力变化曲线。2.2.4实验加药:(1)加入0.02U/ml缩宫素0.2ml,待作用明显后,描记子宫收缩曲线。(2)加入2U/ml垂体后叶素0.2ml,待作用明显后,描记子宫收缩曲线。2.3实验注
6、意事项2.3.1乐氏液每次要注意恒量,而且要注意浴槽的温度。2.3.2换液后,必须待曲线平稳后才能加入下一个药物。2.3.3用乐氏液冲洗标本时,注意不要将冲洗液很快放掉。2.3.4摘取标本时,应注意与肠管鉴别,以免取错标本。3结果与讨论3.1结果记录3.2讨论3.2.1缩宫素使子宫平滑肌收缩力增强的机制。⑴由实验数据可以看出,子宫平滑肌收缩的频率较慢,这是由平滑肌中的ATP分解速度较慢,Ca2+移至细胞外或被肌浆网摄回的过程都很慢所造成的。⑵缩宫素能使Ca2+内流加强,然后使Ca2+充满肌浆网,同时
7、触发触发肌浆网贮存部位Ca2+释放,从而激活平滑肌兴奋-收缩耦联,使平滑肌收缩加强。3.2.2高浓度缩宫素使子宫平滑肌产生强直收缩的机制。高浓度缩宫素能显著增加Ca2+内流,触发肌浆网贮存部位Ca2+释放,使得细胞质内Ca2+显著增高,始终维持在平滑肌的兴奋阈值,肌小节始终处于收缩状态,平滑肌产生强直收缩。3.2.3缩宫素使得子宫平滑肌最大舒张力增高的制剂。缩宫素能增加Ca2+内流,触发肌浆网贮存部位Ca2+释放,使得细胞质内Ca2+增高。在舒张阶段,细胞质内的Ca2+被摄回肌浆网中,使得Ca2+浓
8、度下降,但由于其能力有限,使得在舒张末期时,细胞质内的Ca2+浓度仍然维持在很高的水平,产生较强的舒张力。3.2.3缩宫素使得子宫自律性增高的机制。子宫平滑肌的自律性的产生主要是钠-钙通道的开放,大量的Ca2+和少量Na+内流,引起去极化,形成动作电位。缩宫素能加强Ca2+内流,故而能使子宫平滑肌的自律性增高。
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