纳米磁性微球对人血浆抗体的特异性分离过程.pdf

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1、·12·材料导报B:研究篇2011年8月(下)第25卷第8期纳米磁性微球对人血浆抗体的特异性分离过程王胜男,张莹雪,林志勇,钱浩(1华侨大学材料科学与工程学院,厦门361021;2华侨大学信息科学与工程学院,厦门361021)摘要采用细乳液聚合法制备了嗜硫磁性纳米微球,磁球粒径较小,具有灵敏的磁响应性。经嗜硫性配基(2一巯基噻唑啉)修饰后,在pH=4.0的低浓度柠檬酸缓冲液中可特异性吸附免疫球蛋白G,并实现了在较低盐浓度下被吸附抗体的有效脱附,在吸附过程中表现出明显的单分子层吸附过程。在分离过程中几乎不损伤抗体的生物活性,所分离抗体的生物活性高于99。磁性微球的平衡吸附量为53.0

2、4mg/g,相比于微米级磁性微球的平衡吸附量(3.1mg/g),提高了17倍。关键词细乳液聚合嗜硫纳米微球2一巯基噻唑啉免疫球蛋白G中图分类号:TB324文献标识码:ASpecificIsolationofImmunoglobulinGfromHumanPlasmawithMagneticNanobeadsWANGShengnan,ZHANGYingxue。,LINZhiyong,QIANHao(1CollegeofMaterialsScienceandEngineering,HuaqiaoUniversity,Xiamen362021;2CollegeofInformationS

3、cienceandEngineering,HuaqiaoUniversity,Xiamen362021)AbstractNano-sizedmagneticpolymersphereswithintensemagneticresponseweresynthesizedbyminiemul—sionpolymerization.Aftermodifiedby2-mercaptothiazolineonthesurfaceofthesemagneticnanospheres,thesemag—neticparticlesexhibitedastrongspecificitytoward

4、sIgG.Itwasfoundthattheq(53.04mg/g)ofmagneticpolymernanospheresincreasedby17timescomparedwiththeq(3.1mg/g)ofmicro-spheres.ThisspecificbindingofIgGcouldbeperformedatlowcitricacidconcentration(pH:4.0)andtherespondingdesorptionwasperformedatlowsaltconcentration.Thus,notonlytheselectiverecognitiono

5、fantibodiescouldbecarriedoutunderphysiologicalcondi—tions,butalsotheefficientelutioncouldbeachievedundermildconditions.Itwasmuchfavorabletopreservethebio—activityoftheantibodiesandtoincreasethepurityofIgG.Thebioactivityoftheisolatedantibodiesallexceeded99.Keywordsminiemulsionpolymerization,thi

6、ophilicmagneticnanospheres,2-mercaptothiazoline,IgG随着分子生物学、基因工程和免疫工程的迅猛发展,免补了传统分离技术分离出的抗体纯度低、活性损伤大等不疫球蛋白在诊断技术、疾病防治方面都展现出广阔的应用前足,为抗体的批量化分离纯化探索了一条新的途径。景_1],同时对高纯度、高活性免疫球蛋白G(IgG)的需求日益1实验增长,极大地促进了其纯化工艺的发展l_2]。传统分离IgG的方法分离纯度较低,对抗体的生物活性损伤较大,限制了1.1试剂其广泛利用_5]。其它方法如电泳法、离子交换层析法等,由FeC13·6H2O,FeC12·4H2O,氨

7、水(NH3·H2O,25w/于设备复杂、分离成本昂贵,仅仅在分析测试和小批量分离v),油酸(OA),无水乙醇,NaOH,NaH,四氢呋喃(THF),环方面得到应用l6],为此广大研究者相继把目光聚集到非色谱己烷,十二烷基磺酸钠(SDS)。醋酸乙烯酯(VAc)、二乙烯基技术方面l7。Safarik等[1“利用磁性亲和微球提纯苯(DVB),用前经减压蒸馏处理。过硫酸钾(KPS),十六烷细胞、抗体,结果显示分离出的目标物纯度与蛋白A色谱技(HD,Alfa),二乙烯基砜(DV

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