实验诊断学复习资料（南方医科大学）.doc

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1、实验诊断学复习资料第一章临床血液学检测第二节溶血性贫血的实验室检测一溶血性贫血的筛查实验（一）血浆游离血红蛋白测定1.参考值：<50mg/l2.临床意义：血管内溶血时明显增高，血管外溶血不变，自免和溶血性贫血轻度增高（二）含铁血黄素尿试验1.原理：含铁血黄素和酸化的低铁氰化钾——普鲁士蓝反应。尿沉渣镜下深蓝色物质2.临床意义：血管内溶血可见，常阵发性睡眠性蛋白尿。溶血初期阴性3.正常值：阴性二、红细胞膜缺陷检测——红细胞渗透脆性试验1.正常值：0.42%-0.46%/0.28%-0.34%2.临床意义：（1）增高：>0.5%/0.38%：遗传性

2、球形红细胞增多，温抗体型自身免疫性溶血性贫血，遗传性椭圆形红细胞增多症。（2）减低：海洋性贫血，缺铁性贫血和阻塞性黄疸等。三、红细胞酶缺陷的检测（一）高铁血红蛋白还原试验1.原理：G6DP正常时可以完成2.参考值：>75%，高铁血红蛋白0.3-1.3g/l3.临床意义：G6PD缺陷，高铁血红蛋白还原率减低。见于蚕豆病和伯安奎类药物溶血。（二）变性珠蛋白小体生成试验1.原理：高铁血红蛋白增高生成2.参考值：<30%3.临床意义：增高见于G6PD缺陷症，不稳定Hb,HbH病高于45%四、珠蛋白生成异常——血红蛋白电泳1.原理2.参考值：（阳极→阴极

3、）HbA→HbA2→NH1→NH23.临床意义：（1）HbA2增高：轻型地贫诊断标准。个别恶性贫血、巨幼细胞性贫血，不稳定血红蛋白血病（2）减低：缺铁性贫血和铁幼粒细胞贫血五、自身免疫性溶血性贫血（AIHA）的检测（一）抗人球蛋白试验1.原理：coombs实验，直接阳性说明患者红细胞表面上有不完全抗体；间接阳性说明血清中存在不完全抗体2.参考值：直接和间接都是阴性3.临床意义：（1）阳性：新生儿溶血病、自身免疫性溶血、SLE、类风湿性关节炎、恶性淋巴瘤、甲基多巴和青霉素药物溶血（2）AIHA大多为温抗体型，IgG，必要时要在4℃进行试验排除假阳

4、性,也要用广谱抗人球蛋白血清试验（3）间接：主要用于Rh或ABO妊娠免疫性新生儿溶血母体血清抗体检测（二）冷凝集素试验1.原理：冷凝集素：可逆性抗体，在低温时与自身红细胞等同型红细胞反应，温度增高凝集块消失。2.参考值：效价＜1：40，最适反应温度4℃3.临床意义：AIHA升高六、阵发性血红蛋白尿（PNH）检测（一）酸溶血试验（Ham）1.原理：PNH患者红细胞对补体敏感性增高，在酸化血液中孵育后易溶血2.参考值：阴性3.临床意义：阳性见于PNH和AIHA严重的（二）蔗糖溶血试验1.原理：蔗糖溶液孵育后能加强补体和红细胞膜结合，使细胞膜上产生小

5、孔，蔗糖进入以溶血（PNH患者）2.参考值：阴性3.阳性：PNH。轻度阳性也可见于巨幼细胞贫血、再障、AIHA和遗传性球形红细胞增多。阳性者应再做Ham实验第三节骨髓细胞学检测一、血细胞的生成、发育和正常形态学特征（见组胚）二、骨髓细胞学检查（形态学、免疫、细胞生物学、分子生物学）（一）骨髓形态学检测1.标本采集：骨髓穿刺2.染色：瑞吉染色后显微镜检查3.正常骨髓象——增生活跃，20:1；粒红比值：2-4:1增生程度成熟细胞：有核细胞有核细胞数/HP常见病例增生极度活跃1:1>100急慢性白血病增生明显活跃10:150-100急慢性白血病，增生

6、性贫血增生活跃20:120-50正常骨髓象，增生性贫血增生减低50：15-10再障增生极度减低200:1<5再障（2）粒系：0.4-0.6，原＜百分之二；早＜百分之五；中晚各百分之十五，杆状多于分页，酸五碱一（3）红系：0.2，原一早五中晚十。一、细胞化学染色（一）过氧化物酶染色（MPO）1.目的：鉴别急粒和急淋2.参考范围：粒系：强阳性（是碱性粒细胞阴性，原粒细胞阴性）单核系：弱阳性淋巴系：阴性3.临床意义：鉴别急淋和急粒，一般仅计数幼稚细胞（二）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）1.原理：碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞中。2.参考

7、值：10%-40%3.临床意义：鉴别诊断（1）感染性疾病：急性化脓菌感染增高，病毒感染正常或降低（2）慢粒：明显减低（3）类白血病反应：极度增高，与慢粒鉴别的重要指标（4）急粒：降低（5）急淋：增高（6）急单核：正常或增高（7）再障：增高（8）阵发性睡眠性血红蛋白尿：降低，和再障区别（9）其他血液病（10）腺垂体或肾上腺皮质功能亢进：增高（三）酯酶染色1.特异性酯酶染色1.1粒细胞酯酶（AS-DNCE）（1）原理：氯化醋酸AS-D萘酚酯酶主要存在粒细胞中，原粒细胞阴性。早幼粒细胞强阳性，之后又减弱（2）临床意义：急粒强阳性，急淋阴性，急粒-单核

8、部分阳性部分阴性1.2α-丁酸萘酚酯酶染色（单核细胞酯酶）α-NBE1.3酯酶双染：粒-单核系白血病诊断2.非特异性酯酶染色（α-NAE）鉴别诊断必须