二氯酚靛酚滴定法定量测定维生素.doc

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1、2,6-二氯酚靛酚滴定法定量测定维生素C目的和要求掌握2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。原理维生素C(Vc)又称抗坏血酸(ascorbicacid)。最初于1928年从牛的肾上腺皮质中提取出结晶物，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效。氧化型2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中呈粉红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色，还原型2,6-二氯酚靛酚无色。当用此染料滴定含有Vc的酸性溶液时，在Vc未全部氧化前，滴下的染料立即被还原成无色；一旦溶淀中的Vc全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液显示粉红色，此时即为滴定终点，表示溶液中的Vc刚刚被氧化完全。

2、因此，从滴定时2,6一二氯酚靛酚标准液的消耗量，可以计算出被检物质中Vc的含量。操作步骤1.样液制备适量称取苹果和青椒各一份，分别加少量2%草酸(1%草酸因浓度太低而不能抑制抗坏血酸氧化酶作用)用研钵磨成浆，漏斗+脱脂药棉过滤，滤液转入25ml容量瓶后用2%草酸定容。2.标准液滴定准确吸取0.1mg/ml的标准抗坏血酸溶液各1.0ml，分置两个100ml锥形瓶中，加入1%草酸9.0ml，用微量滴定管以0.1%的2,6-二氯酚靛酚滴定至淡红色，并保持15s即为终点。由所用染料的体积计算出T值(平均值)，即1ml染料相当于多少mg的Vc。3.样

3、液滴定准确吸取已制备的样品滤液各两份，每份10.0ml分别放入两个100ml锥形瓶内，滴定方法同前注意：1.滴定过程宜迅速，一般不超过2min，因为样品中某些杂质亦能还原二氯酚靛酚，尽管其还原能力较弱且还原速度较Vc更慢2.滴定所用染料宜控制于1~4ml，如果样品含Vc含量过高/低，可酌量增/减样液3.样品提取液应避免日光直射，否则会加速Vc氧化计算m=VT/m0×100式中m：100g样品中含Vc的质量(mg)V：滴定时所用去染料体积(ml)T：每毫升染料能氧化Vc质量数(mg/ml)m0：10ml样液含样品之质量数(g)试剂和器材试剂

4、1.2%草酸溶液2.1%草酸溶液3.标准抗坏血酸溶液(0.1mg/ml)棕色瓶贮存，冷藏(最好临用时配置)4.1%HCl溶液5.0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液棕色瓶贮存，冷藏(4℃下可保存一周)，临用时以标准抗坏血酸液标定器材1.新鲜蔬菜(辣椒、青菜、西红柿等)、新鲜水果(橘子、柑子、橙、苹果等)2.吸管1.0ml、10.0ml3.容量瓶25ml,100ml4.微量滴定管5ml5.天平6.研钵7.漏斗Φ8cm.思考题1.为什么滴定终点以淡红色存在15s内为准？2.要测得准确的Vc值，实验过程中应注意哪些操作步骤，为什么？