2016新课标三维人教生物选修1---专题二--课题1--微生物的实验室培养.doc

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1、课题1微生物的实验室培养1．培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。2．消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。3．实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。4．固体培养基的配制过程为：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。5．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。6．长期保存菌种可以采用甘油管藏法。一、培养基1.概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。2.种类：(按物理

2、性质分)液体培养基固体培养基3.营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。二、无菌技术1.获取纯净培养物的方法获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，具体操作如下：(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2．消毒和灭菌(1)概念：[填表]比较项目理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能

3、否被消灭消毒较为温和物体表面或内部的部分微生物不能灭菌强烈物体内外所有的微生物能(2)常用方法：[连线]三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。2.纯化大肠杆菌(1)纯化原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。(2)接种方法：①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。(3)培养：将接种后的培养基

4、和一个未接种的培养基都放入37_℃恒温箱中，培养，12h和24h后，分别观察、记录。四、菌种的保存[连线]1．不同培养基的具体配方不同，但一般都含(　　)A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素解析：选C　培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。2．获得纯净培养物的关键是(　　)A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌B．接种纯种细菌C.适宜环境条件下培养D．防止外来杂菌的入侵解析：选D　获得纯净培养物的关键是防止外来微生物的污染。3．下列关于消毒

5、和灭菌方法的选择，对应错误的是(　　)A．培养基——高压蒸汽灭菌B．牛奶——煮沸消毒C．接种环——灼烧灭菌D．实验者双手——化学消毒解析：选B　对牛奶应采用巴氏消毒法进行消毒。4．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是(　　)A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板解析：选C　制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，应先根据需要计算各成分用量，然后称量、溶化、灭菌、倒平板。5．下列有关稀释涂布平板法的叙述，错误的是(　　)A．首先将菌悬液进行一系列的梯度稀释B．然后将不同稀释度的菌悬液分

6、别涂布到琼脂固体培养基的表面C．在适宜条件下培养D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落解析：选D　稀释涂布平板法是将菌悬液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌悬液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养。只有在稀释度足够高的菌悬液里，聚集在一起的微生物才能被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个的菌落。1．培养基配制的原则(1)目的要明确：不同的微生物需求不同，根据培养目的进行配制。(2)营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。营养物质浓度过低不能满足微生物营养需要，过高对微生物的生长有抑制作用。(3)pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同，如

7、细菌的适宜pH约为6.5～7.5、放线菌的适宜pH约为7.5～8.5、真菌的适宜pH约为5.0～6.0。为维持pH的相对恒定，可在培养基中加入缓冲剂，常用的缓冲剂是磷酸氢二钾—磷酸二氢钾。2．培养基的成分营养物质定义作用主要来源碳源凡能提供碳元素的物质构成生物体细胞的物质和一些代谢产物，有些也是异养生物的能源物质无机碳源：CO2、NaHCO3等；有机碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源凡能提供氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机氮源：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子生长必不可少的微量有机物是酶和核酸的组成成