敲低膜联蛋白A7对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响.pdf

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1、承德医学院学报J0URNALOFCHENGDEMEDICALCOLLEGEVO1．32NO．32015敲低膜联蛋白A7对乳腺癌MCF一7细胞凋亡的影响田焕娜，吴雪艳△，王小杰(承德医学院，河北承德067000)【摘要】目的：观察靶向敲低人乳腺癌MCF一7细胞膜联蛋白A7(AXNA7)的表达对MCF-7细胞凋亡的影响。方法：实验分为3组，以靶向AA7的A转染MCF一7细胞为RNA干扰组，另设阴性对照组、空白对照组，采用RT-PCR法和Wc~temblot法检测转染后MCF一7细胞ANXA7的表达情况，应用流式细胞术检测AN=7低表达对MCF-7细胞凋亡的影响。结果：转染后

2、，A干扰组细胞ANⅪ7的表达明显低于阴性对照组和空白对照组(尸<0．05)；敲低ANⅪ7后，MCF一7细胞凋亡明显增加(P<0．05)。结论：ANⅪ7低表达可促进乳腺癌细胞MCF-7凋亡。【关键词】膜联蛋白A7(AXNA7)；乳腺~MCF-7细胞；凋亡【中图分类号】R737．9【文献标识码】A【文章编号11004--6879(2015)03-0193-03EFFECTSOFAXNXA7l《『()IDoWNONAPOPTOSISOFBREASTCANCERMCF-7CELLSTIANHuan-na,WUXue-yan,WANGXiao-jie(ChengdeMedical

3、College,HebeiChengde06700~China)【ABs]ⅡT】Objective：ToinvestigatelowexpressionofAnnexinA7(ANXAT)onapoptosisofbreastcancerMCF·7cellsbytarget-silencingANXA7expression．Methods：MCF一7cellsweregroupedintosiRNAinterferencegroup，negativecontrolgroupandblankcontrolgroup．RNAinterferencetechnologywas

4、usedtotransfectthesiRNAtargetedANXA7intoMCF-7cellstoknockdownexpressionofANXA7．WesternblotandRT-PCRwasusedtodetecttheexpressionofANXA7aftertransfecfion；FlowcytometrywasusedtodetectefectsoflowexpressionOfAJ)(A7onapoptosisofMCF-7cells．Results：TheexpressionofANXA7inMCF一7cellsofsiRNAinterfer

5、encegroupwereobviouslylowerthannegativecontrolgroupandblankcontrolgroup<0．05)．TheapoptosisofMCF-7ceilsincreasedafterknockingdownexpressionofANXA7(P<0．05)．Conclusions：LowexpresionofANXA7canpromoteapoptosisofbreastcancerMCF-7cells．【KEYⅥlRDS】AnnexinA7(ANXA7)；BreastcancerMCF．7cells；Apoptosis

6、膜联蛋白A7(AnnexinA7，AXNA7)是膜联蛋白家Invitrogen公司；蛋白定量试剂盒，上海生工生物工程有族成员，该家族具有典型的磷脂结合、Ca2+通道形成等特限公司。性⋯。有研究显示，AXNA7参与细胞的多种生物学行为，1．2细胞培养乳腺癌MCF一7细胞于含10％胎牛血清在膜转运、细胞分化、凋亡、生长调节及钙离子信号途径的DMEM中，5％CO，、37~C孵箱中常规培养。等方面发挥广泛的功能。多种肿瘤组织ANⅪ7的表达1．3细胞转染和实验分组转染前一天将细胞种植于发生了变化，提示ANXA7表达异常与多种肿瘤的发生发6孔板中，使细胞在24h内达到40-60％的

7、密度。按照脂质展相关。乳腺癌是严重威胁妇女生命健康的常见恶性体ⅡpOfectamjne20o0试剂说明书进行转染，按siRNA肿瘤之一，有研究发现ANXA7与乳腺癌关系密。本研oligo20pml／~L、脂质体51／孔，分别将萄RNAoligo和究拟采用RNA干扰技术敲低乳腺癌MCF一7细胞ANⅪ7脂质体加入无抗生素、无血清的DM培养液25l中的表达，观察ANⅪ7低表达对乳腺癌细胞凋亡的影响，混匀，静置5min；然后将两液混合，室温放置20min；将以期为乳腺癌的临床治疗提供新思路。5001脂质体RNA混悬液逐滴加入培养板，轻轻混匀，1材