脐带血血清分离培养人胎盘间充质干细胞.pdf

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1、第4O卷第4期贵阳医学院学报Vo1.40N0.42015年4月JOURNALOFGUIYANGMEDICALCOLLEGE2015.4脐带血血清分离培养人胎盘问充质干细胞周心涛,赵黎丙,闵新文,陈娇,郎明健(湖北医药学院附属东风医院,湖北十堰442000)[摘要]目的:探讨脐带血清(UCBS)分离、培养人胎盘问充质干细胞(PMSCs)的增殖及分化能力。方法:将UCBS处理后用于分离、培养PMSCs作为实验组,同体积FBS分离、培养PMSCs作为对照组,用相差显微镜观察实验组与对照组PMSCs的形

2、态、流式细胞仪检测PMSCs表面标志、MTr法检测PMSCs的增殖能力。结果:10%UCBS的培养液分离纯化的PMSCs成梭形、增殖能力强,具有分化为成骨细胞和脂肪细胞的能力,高表达CD29、CD44及CD105,低表达或不表达CD34、CD45及HLA.DR;与对照组相比,UCBS组细胞增殖能力更强。结论:脐带血清能分离、培养及扩增PMSCs,培养的PMSCs的增殖能力及分化潜能好于FBS。[关键词]脐带;血清;间充质干细胞;流式细胞术;细胞培养[中图分类号]R329.24;R34—33[文献

3、标识码]A[文章编号]1000-2707(2015)04-0373-04IsolationandCultureofHumanPlacentaDerivedMesenchymalStemCellsinUmbilicalCordSerumZHOUXintao,ZHAOLibing,MINGXinwen,CHENJiao,LANGMingjian(TheAffiliatedDongfengHospitalofHubeiMedicalCollege,Shiyan442000,Hubei,China)[A

4、bstract]Objective:Toinvestigatetheproliferationanddifferentiationabilitiesofhumanplacentamesenchymalstemcells(PMSCs)isolatedandculturedinhumanumbilicalcordbloodserum(UCBS).Methods:PMSCsisolatedandculturedinUCBSservedasexperimentgroupandthesamevolumeP

5、MSCsisolatedandculturedinFBSservedasthecontro1.PMSCscellgmorphologywereob-servedunderphasecontrastmicroscope,flowcytometrywereusedtodetectedcellsurfacemarkers,MTrwereusedtotestcellproliferationactivity.Results:PMSCsisolatedandculturedin10%UCBSwerespi

6、ndleshaped,havinghighreproductiveactivityandcouldbeinducedtoosteoblastsandadipo—cytes,highlyexpressedCD29,CD44andCD105,butlowlyexpressedordidntexpressCD34,CD45andHLA—DR.Theproliferationofexperimentgroupwasstrongerthanthatofcontrolgroup.Conclu-sions:U

7、CBScanbeusedtoisolateandculturePMSCs,andtheproliferationanddifferentiationabili—tiesofPMSCsinUCBSarebetterthanthoseinFBS.[Keywords]umbilicalcord;serum;mesenchymalstemcell;flowcytometry;cellculture来源于正常足月分娩胎盘的人胎盘问充质干后细胞的表型、分化能力的改变,探讨UCBS分离、细胞(humanpla

8、centamesenchymalstemcells,PM.培养及扩增PMSCs的可能性。SCs)具有来源广、免疫原性低等优点,还具有自我更新和无限增殖的能力,能向多谱系分化I2J。本1材料和方法实验通过利用正常足月分娩的脐带血清(umbilicalcordbloodserum,UCBS)分离、培养PMSCs,观察细1.1主要试剂胞形态、数量、扩增所用时间、细胞周期及培养前L.DMEM(Gibco)、胎牛血清(Gibco),胰蛋白’通信作者E-mail:lmjian1976@163.COrn网络出

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