磺胺类药物广谱性多克隆抗体的制备.pdf

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1、ChineseJournalofVeterinaryMedicine中国兽医杂志2012年(第48卷)第12期67磺胺类药物广谱性多克隆抗体的制备魏镭，王战辉，江海洋，杨光。，徐飞。，李娜。(1．中国农业大学动物医学院，北京海淀100193；2．国家兽药残留基准实验室，北京海淀100193；3．北京维德维康生物技术有限公司，北京海淀100085)摘要：基于磺胺类药物(Sulfonamides，SAs)公共母环(对氨基苯磺酰胺)结构，合成了两种具有该结构的半抗原：2-(对氨基苯磺酸氨基)一4一噻唑乙酸(Ts)和对氨基苯磺酰胺基苯甲酸(SS)。采用碳二亚胺法合成

2、了免疫原和包被原，分别免疫1O只新西兰大白兔，制备广谱性磺胺类药物抗体。应用间接竞争酶联免疫吸附分析(ELIsA)检测血清的灵敏度和特异性，发现所有兔子对TS-BSA和SS-BSA均产生较高效价和特异性。其中SS-1号和TS-6号兔的血清灵敏度最好，效价分别为1：80000和1：160000，对1O种磺胺类药物均有不同程度的识别能力。SS-BSA组IC。为257．9～6590,9ng／mL，而TS-BSA组IC。为12．9～586．1ng／mL。结果表明，具有磺胺母环结构的半抗原TS和SS，可以应用于广谱性磺胺类抗体的制备。通过1O只兔子免疫试验证明，应用S

3、S获得的血清具有较高的簇特异性、相似的亲和性，优于TS。关键词：磺胺类药物；半抗原；多克隆抗体；ELISA中图分类号：$852．4文献标识码：A文章编号：0529—6005(2012)12—0067—03Preparationofbroad-specificitypolyclonalantibodyagainstSulfonamideWEILei，WANGZhan-hui，JIANGHai-yang，YANGGuang。，XUFei。，LINa3(1．CollegeofVeterinaryMedicine，ChinaAgriculturalUniversit

4、y，Beijing100193，China；2．NationalReferenceLaboratoriesforVeterinaryDrugResidue，Beijing100193，China；3．BeijingWDWKBioteehnologyCo．，Ltd．，Beijing100085，China)Abstract：HaptenTSandSSwiththecommonstructure(p-anilinesulfonamide)ofsulfonamidesweresynthe—sized．Haptenswereconjugatedtobovineser

5、umproteinandalbuminbyEDCmethod。whichwereusedtoimmu—nize10NewZealandWhiterabbitstomakethebroad-specificitypolyclonalantibodyandcoatingantigen。respec—tively．ThesensitivityandspecificityofantiseraweremeasuredbyELISA．Theresultsshowthatallrabbitspres—entedhighantiseratiterandrelativelys

6、pecificrecognitiontosulfonamides．ThesensitivityoftheantiseraofNo．S1andTS-6tosulfonamidesinELISAwerethebesttwowiththeantiseratiterof1：80000and1：160000．respectively．TheantiseraofNo．SS-Icouldrecognize10sulfonamidesshowing50inhibition(IGa0)ataconcen—trationof257．9ng／mLto6590．9ng／mL，whi

7、letheantiseraofNo．TS-6couldat12．9ng／mLto586．1ng／mL，respectively．Keywords：sulfonamdes；hapten；polyclonalantibody；ELISACorrespondingauthor：JIANGHai-yang磺胺类药物(Sulfonamides，SAs)是一类化学合成胺母核结构的半抗原TSl3]、PS等¨4]，其IC。分别小抗菌药，广泛用于食品动物。但如使用不合理，极易在于5000ng／mL和i0000ng／mL。李喜旺等合成动物组织中残留，会对人类健康和畜牧业造成危害

8、。了4种具有母核结构的半抗原，并制备了3种抗原因此，