红霉素可抑制弹性蛋白肽诱导的CD4^＋T细胞向Th17细胞分化.pdf

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1、细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolhnmuno1)2015，31(3289·论著·文章编号：1007—8738(2015)03—0289—04红霉素可抑制弹性蛋白肽诱导的CIMT细胞向Thl7细胞分化刘积锋，钟小宁，何志义，覃向林，牙蕾蕾，张建全(广西医科大学第一附属医院呼吸内科，广西南宁530021)[摘要]目的探讨红霉素对弹性蛋白肽暴露下CD4T细胞向Thl?细胞分化的影响。方法从小鼠脾脏经免疫磁珠分选出CD4T细胞，随机分为空白对照组、弹性蛋白肽组和弹性蛋白肽加红霉素干预组。弹性蛋白肽组和弹性蛋白肽联合红霉素处理组加入终浓度30Ixg／mL的弹性蛋白肽，

2、弹性蛋白肽联合红霉素处理组在弹性蛋白肽处理的基础上，另外加入100p,g／mL的红霉素。3组细胞在无血清培养液培养24h，用流式细胞术检测Thl7的百分比，荧光定量PCR检测维甲酸相关孤儿核受体t(ROR~／t)mRNA表达，Westernblot法检测核因子KB(p65)[NF-KB(p65)]及信号转导子和转录激活子3(STAT3)蛋白相对含量。结果弹性蛋白肽组CIMIL-17细胞的百分比为(11．324-2．34)％、对照组为(5．214-1．36)％；qRT-PCR发现ROR~／tmRNA表达比对照组明显增加，Westernblot法检测发现NF-KB(p65)和

3、STAT3蛋白表达比对照组增强。与弹性蛋白肽组比较，弹性蛋白肽联合红霉素处理组的CIMIL一17细胞的百分比、ROR-,／tmRNA表达、NF-KB(p65)和STAT3蛋白表达明显减少。结论红霉素可抑制弹性蛋白肽诱导CD4T细胞向Thl7分化。[关键词】红霉素；弹性蛋白肽；CD4T细胞；Th17细胞[中图分类号]R563，Q254，R392．12，R392．33[文献标志码]Allr唧dninhibitselastin0e~des·induceddiferentiationofCIMTcellsintoTh17cellsLIUJifeng，ZHONGXiaoning，H

4、EZhiyi，QINXianglin，YALeilei，ZHANGJianquanDepartmentofRespiratoryMedicine，FirstAffiliatedHospital，GuangxiMedicalUniversity，Nanning530021，China[Abstract]0bjectiveToinvestigatetheefectoferythromycinondiferentiationintoThelper17(Thl7)cellsfr0mCD4Tcellsexposedtoelastinpeptides．MethodsTheCD4Tce

5、lsfromspleenofmaleBALB／cmicebymagneticbeadsortingwererandomlydividedintothecontrolgroup(groupA)，theelastinpeptidesgroup(groupB)anderyth∞mycingroup(groupC)．ThecellsingroupBandCwereculturedinserum-freemediumsupplementedwith30pglmLelastinpeptides．ThecellsingroupCwereaddRionallyadministratedw

6、itherythromycinatadoseof100ug／mL．A¨oftheCD4Tcellswereculturedinserum．freeculturesolutionfor24hours．ThenumberoftheTh17celswasdetectedbyflowcytometryandtheexpressionofretinoicacidrelatedorphannuclearreceptoryt(RORyt)mRNAwasmeasuredbyfluorescencequantitativePCRineachgroup．TheexpressionsofNF-

7、KB(p65)andsignaltransducerandactivatoroftranscription3(S)wereanalyzedbyWesternblotting．ResultsTheThl7cellsingroupB[(11．324-2．34)％]increasedascomparedwiththatingroupA[(5．214-1．36)％]，andtheexpressionofRORytmRNAingroupBwashigherthanthatingroupA．Furthermore，theexpressio