金线莲组培快繁体系优化及多糖含量测定.pdf

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1、澎江右中学第56~2o15年第7期U文献著录格式：袁小铃，王建栋，王思雨，等．金线莲组培快繁体系优化及多糖含量测定[j]．浙江农业科学，2015，56(7)：983—985DOI：10．16178／j．issn．0528-9017．20150710金线莲组培快繁体系优化及多糖含量测定袁小铃，王建栋，王思雨，张熠玲，刘洪波，邵清松，梅绿妍，王红珍(浙江农林大学林业与生物技术学院，浙江临安311300)摘要：金线莲野生资源极度匮乏，以微扦插苗繁殖种苗并不能有效缓解紧缺现状。通过选择最佳外植体、激素配比及适合添加物，以优化金线莲

2、组培快繁技术。结果表明，金线莲组培快繁最佳外植体为在0．3—0．5cm节处断开的茎段；6-BA／NAA浓度比为6：1；添加0．3％的活性炭不能明显促进愈伤组织和丛生芽的形成，甚至略微抑制丛生芽的形成。炼苗采用泥炭和河沙的混合物，并用薄膜覆盖。通过超声辅助法提取金线莲多糖，并用苯酚一硫酸法测定多糖含量可知，组培苗与微扦插苗多糖含量并无明显差异。关键词：金线莲；外植体；激素配比；添加物；多糖含量中图分类号：S567文献标志码：B文章编号：0528—9017(2015)07—0983-03金线莲也叫金线兰，为兰科开唇兰属选用不同

3、长度(带节和节处断开)的茎段为外植(Anoectochilus)花叶开唇兰和金线兰(A．体，接种到不同培养基上进行诱导愈伤组织、丛生formosanusHayata)的全草。其味甘、性平，具有芽、生根培养等。凉血祛风，除湿解毒、强心利尿、固肾平肝等功1．2超声波辅助法提取金线莲多糖效，主治肾炎、肺炎、高血压、糖尿病、高血压、用超声波辅助法提取金线莲多糖，金线莲恒乙型肝炎等症¨。在民间有“药王”或“神草”温干燥粉碎后过40目筛，称取适量粉末，按料液比之称。金线莲含有金线莲苷、黄酮类、多糖、挥发1：35加入超纯水，60cc超声

4、30min，4200rpm·油、甾体和三萜类化合物、维生素和矿物元素min离心15min，收集上清。重复提取残渣3次，等⋯。其中植物多糖有调节免疫能力、抗肿瘤、合并3次提取液。上清中加入活性炭进行脱色处降血糖、抗衰老、保肝等功效。理，抽滤后真空旋转蒸发至10mL，加入40mL无金线莲种子发芽率低，根系不发达，再加上各水乙醇，4℃过夜沉淀多糖，离心收集沉淀后溶于种病原物的侵袭，生态环境的破坏和人类的过度采40mL超纯水。测定多糖含量，每个样品重复挖，使野生金线莲资源处于濒临枯竭的状态。目前3次。常用1～2cm茎段作为外植体的

5、微扦插法获得种苗1．3苯酚-硫酸法测定金线莲多糖含量用于人工栽培，因为繁殖系数低，并不能有效缓解5％苯酚溶液的配制。将苯酚晶体加热融化，金线莲原植物资源匮乏的现状。本文对金线莲组培取5mL苯酚溶液加水定容至100mL，装入棕色瓶快繁技术进行优化，并对多糖含量进行测定，以确中避光备用。定组培苗能否代替微扦插苗作为种苗用于人工栽葡萄糖溶液的配制。葡萄糖105℃恒温干燥培，以缓解金线莲资源匮乏的现状。2h，冷却至室温，配制成浓度为1mg·mL的标准液，4℃保存备用。分别取标准液0．1，0．2，1材料与方法0．3，0．4，0．5，

6、0．6mL，加蒸馏水至2．0mL，分1．1植物材料别加入1．0mL5％苯酚溶液混匀和浓硫酸5．0mL，花叶开唇兰(A．Roxburghii)无菌苗在16h摇匀后静置10min，紫外分光光度计测定器490nm光照／8h黑暗和25℃条件下生长至株高5～6cm。处的吸光度(D。)。收稿El期：2015-02-II基金项目：浙江省自然科学基金(LY14H280008)；浙江农林大科研发展基金人才启动项目(2014FR062)作者简介：袁小玲(1994一)，女，浙江吴兴人，本科生，生物制药专业。通信作者：王红珍，从事药用植物资源优化

7、与改良研究工作。E·mail：wang．hongzhen@163．corn。袁小铃，等：金线莲组培快繁体系优化及多糖含量测定圆4．36，4．45，4．13mg·mL～，平均浓度为4．3l芽的过程中发挥中一定的作用。mg·mL～，微扦插苗多糖含量分别为17．46％，通过优化组培快繁技术，使金线莲的不定芽／17．53％，16．58％，平均为17．19％。两者多糖含量无外植体达到30～40，远高于微扦插不定芽／外植体显著差异。1～2，极大增强了濒危金线莲资源的繁殖系数，同时，其重要的活性成分，如多糖含量并无明显差表1组培苗和微扦

8、插苗的多糖含量异，因此利用组培苗代微扦插苗作为种苗，是缓解金线莲资源紧缺的有效途径。参考文献：南京中医药大学．中药大辞典[M]．2版．上海：上海科学技术出版社，2005．[2]福建中医药研究所．福建药物志第2册[M]，福州：福建科技出版社，1982：215．[3]钱青，张志勇．植物活性多糖的药理作用及应