诃子水提物对肺癌 A549细胞中 p53表达的影响.pdf

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1、CHINESEJOURNAL0FANAT0MYVo1．38No．32015解剖学杂志2015年第38卷第3期诃子水提物对肺癌A549细胞中p53表达的影响田云鹏耿世佳崔珈衔任明姬h赵鹏伟。杨丽敏。(内蒙古医科大学，1组织学与胚胎学教研室，2解剖学教研室，3病原生物学实验室，呼和浩特O10059)摘要目的：探讨诃子水提物对人肺癌A549细胞增殖的影响及p53在此过程中的作用。方法：以不同浓度的诃子水提物干预人肺癌A549细胞为实验组，未经干预的为空白对照组。采用MTT法检测1O、1、0．1、0．01／~g／ml诃子水提物分别作用24、48、72hA549细胞后的增殖抑制率；Real-timePC

2、R法检测p53在不同浓度诃子水提物作用前后的相对表达量的变化；免疫细胞荧光法检测p53蛋白的表达。结果：MTT法检测结果显示，增加水提物浓度，抑制率随之上升；PCR法检测显示，实验组较对照组p53的mRNA表达量上调；免疫细胞荧光法检测显示，实验组较对照组p53蛋白表达增多，并与水提物浓度成正比。结论：诃子水提物能诱导A549细胞凋亡，可能与p53基因被激活有关。关键词诃子水提物；肺癌A549细胞；p53Expressionofp53inA549cellstreatedbyaqueousextractofterminaliaTianYunpeng，GengShiia，CuiJiaxian，Re

3、nMingjiH，ZhaoPengwei。，YangLimina(1．DepartmentofHistologyandEmbryology，2．DepartmentofAnatomy，3．PathogensandImmunologyLaboratory，InnerMongoliaMedicalUniversity，Hohhot010059，China)AbstractObjective：ToinvestigatetheeffectsofaqueousextractofterminaliononA549humanlungcancercellproliferation，andthepossible

4、roleofp53intheprocess．Methods：DifferentconcentrationsofaqueousextractofterminaliawereusedtotreathumanlungcancerA549cellsindifferentexperimentalgroups．ProliferationinhibitionratewasdetectedbyMTTassayat24，48and72hwithdifferentconcentrations(10，1，0．1，0．01~g／m1)aqueousextractofterminalia．p53mPNAexpressi

5、onlevelwasdetectedbyreal-timePCRassay；p53proteinexpressionwasdetectedbyimmunofluorescenceassay．Results：MTTassayshowedthattheproliferationrateofA549cellstreatedbyaqueousextractofterminaliawasgraduallyincreased．p53expressioninproteinandmRNAlevelwerehigherinexperimentalgroupthanthatincontrolgroup．Concl

6、usion：AqueousextractofterminaliacaninducetheapoptosisofA549cells，andthisprocessisrelatedtotheactivationofp53gene．Keywordsaqueousextractofterminalia；A549cells；p53肺癌是最常见的肺原发性恶性肿瘤，绝大多数肺物与免疫研究中心提供。肺癌细胞系A549购自中国癌起源于支气管黏膜上皮，故亦称支气管肺癌。近50科学院细胞库。多年来，世界各国特别是工业发达国家，肺癌的发病率p53和~-actin抗体均购于CellSignalTechnology和病死

7、率均迅速上升，死于癌病的男性中肺癌已居首公司；MTT购自日本WakoPureChemicalIndustries位L1]。诃子(terminaliachebularetz．)在中医、蒙医中公司；RT和实时定量PCR试剂盒购自于大连宝生物的应用有着悠久的历史。有研究表明其水煎液对小鼠公司；RNA提取试剂盒购白天根生物公司；NC膜购自腹水瘤、梭形细胞肉瘤等有较强的作用_2]。本研究通密理博公司；免疫荧