高效液相色谱法分析吡咯喹啉醌.pdf

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1、生物技术通讯v26LETTERSINBIOTECHNOLOGYVO1．LO⋯I~O．Z～NIar,．‘⋯ZUJ5J241doi：10．3969~．issn．1009—0002．2015．02．020研究报告高效液相色谱法分析吡咯喹啉醌魏静远，李大攀，赵炜楠。，葛欣，毕波，熊向华，汪建华，杨秀萍，张惟材1．首都师范大学，北京100048；2．军事医学科学院生物工程研究所，北京100071；3．莫纳什大学工程学院，维多利亚州3800，澳大利亚[摘要]目的：建立一种通过高效液相色谱(HPLC)定量测定吡咯喹啉~(PQQ)的分析方法。方法：将PQQ标准品及发酵制备的PQQ结晶粉末溶于10mm

2、ol／LNaOH溶液，利用高效液相色谱仪进行测定。采用WatersXBridgeC18(4．6mmxl50mm，5m)作为分离柱，用甲醇一水(用三氟乙酸调节pH值为1．0)梯度洗脱，流速为1．0mL／min，于室温下检测PQQ，检测波长为365．8nm。结果：检测得PQQ标准品的保留时间约为7．8min，在0．03125-1mg／mL范围内线性关系良好，相关系数(r2)在O．9999以上，平均回收率为98．6％。结论：高效液相色谱法分析PQQ的灵敏度和准确度高，是一种可靠的PQQ定量分析方法。[关键词]高效液相色谱；吡咯喹啉醌；分析方法[中图分类号]Q503[文献标识码]A[文章编号

3、]1009-0002(2015)02-0241-04DeterminationofPyrr0l0quin0lineQuininebyHighPerformanceLiq-uidChromatographyWEIJing—Yuan，LIDa—Pan，ZHAOWei—Nan。，GEXin。，BIBo，XIONGXiang—Hua，WANGJian—Hua。，YANGXiu—P，ZHANGWei—Cai。1．CapitalNormalUniversity，Beijing100048，China；2．BeijingInstituteofBiotechnology，Beijing100071，

4、China；3．FacauhyofEngineering，MonashUniversity，Victoria3800，AustraliaCorrespondingauthor，E—mail：drzhangwc@l63．tom[Abstract]Objective：Toestablishaquantitativeanalysismethodforpyrroloquinolinequinone(PQQ)byhighper-formanceliquidchromatography(HPLC)．Methods：ThePQQstandardandfermentationsampleweredi

5、ssolvedwith10mmol／LNaOHsolutionandanalyzedbyHPLCmethod．PQQwasseperatedonaWatersXBridgeC18col—umn(4．6mm~150mm，5tzm)withagradientmobilephase(methanolandwater，pHwasadjustedto1．0bytriflu—oroaceticacid)at1．0mL／minflowrate．Thedetectivewavelengthwas365．8nm．Results：TheretentiontimeofPQQstandardwasabout

6、7．8minandthelinearcorrelationcoeficientwasabove0．9999from0．03125to1mg／mL．Theaveragerecoveryratewas98．6％．Conclusion：HPLCwasareliablequantitivemethodindeterminationofPQQwithhighsensitivityandaccuracy．[Keywords]highperformanceliquidchromatography；pyrroloquinolinequinone；analysismethod吡咯喹啉醌(pyrrolo

7、quinolinequinone，PQQ)是泳法、光谱法、NBT—Gly法、重组酶法、高效液相色谱一种由多种革兰阴性菌产生的，继烟酰胺、核苷酸和法、质谱法等，其专一性、灵敏度、精密度、重现性等黄素核苷酸后发现的第三类氧化还原酶的辅酶，其各有局限性。高效液相色谱法(HPLC)操作简便、快结构如图111-4]。PQQ具有抗氧化、调节体内自由基速，准确度和灵敏度较高，但已报道的高效液相色谱水平、促进神经生长因子再生等多种生理功能，有学法分析PQQ嘲的分离效果不够