高效液相色谱法测定4种石磺中牛磺酸的含量.pdf

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1、第37卷第1期海洋渔业Vo1．37，No．12015年01月MarineFisheriesJan．，2015文章编号：1004—2490(2015)O1—0093—06·研究简报·高效液相色谱法测定4种石磺中牛磺酸的含量孙变娜，沈和定，吴洪喜一，姚理想(1．上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306；2．浙江省海洋水产养殖研究所，浙江温州325005；3．浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点试验室，浙江温州325005)摘要：利用高效液相色谱邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生法测定瘤背石磺(Onchidiums

2、truma)(上海崇明)、里氏拟石磺(Paraoncidiumreevesii)和平疣桑椹石磺(Platevindexmo~oni)(福建厦门)、紫色疣石磺(Peroniaverruculata)(广东湛江)肌肉组织中牛磺酸的含量。结果表明，瘤背石磺、紫色疣石磺、里氏拟石磺、平疣桑椹石磺的肌肉组织中牛磺酸平均质量浓度分别为6740．42、7168．96、5545．42、5263．33mg·kg～。紫色疣石磺和瘤背石磺的牛磺酸含量均较高，两者无明显差异。关键词：瘤背石磺；里氏拟石磺；平疣桑椹石磺；紫色疣石磺；高效液相色谱法；邻苯二甲醛；牛

3、磺酸；含量测定中图分类号：Q175文献标识码：A石磺科(Onchidiidae)贝类隶属软体动物门样硬化等功效，并具神经、免疫、呼吸等保护作(Mollusca)，腹足纲(Gastropoda)，肺螺亚纲用，是海洋生物中的一种重要的天然生理活性(Pulmonata)，缩眼目(Systellommatophora)，石磺物质。目前牛磺酸的测定方法主要有分光光度总科(Onchidiidae)。该科贝类身体柔软无贝壳，计法、薄层层析法、氨基酸自动分析法和高效液出肉率很高，广泛分布于印度一太平洋沿岸的河相色谱法(HPLC)等。高效液相色谱法在测定

4、食口海域，大多栖息于浅海、潮问带或高潮带的岩品和生物组织中牛磺酸含量的应用中日益广礁、红树林、芦苇丛、大米草滩等沿岸湿地及潮上泛引。柱前衍生高效液相色谱法是高效液相带，适应性强、资源量比较丰富、食用历史悠色谱法测定牛磺酸比较常用的方法之一l19,26]。久口-2]。在《中国海洋药物辞典》中有如下记应用较多的柱前衍生反应试剂是邻苯二甲醛载：石磺别名土海参，四季捕捞，捕后洗净，除去(OPA)，迄今未见报道利用OPA柱前衍生内脏，取肉鲜用；肉入药；有滋补强壮之功效；主HPLC法测定石磺中牛磺酸含量的研究。本实验治肝硬化、久病体虚等症状。目前国

5、内外对石磺利用该方法对瘤背石磺(Onchidiumstruma)、里氏的研究主要集中在系统分类I4、生物学特拟石磺(Paraoncidiumreevesii)、平疣桑椹石磺性一、受精机制、繁殖、胚胎发育“、(Platevindexmortoni)、紫色疣石磺(Peronia神经系统、线粒体基因组全序列分析¨J、营养verruculata)肌肉进行牛磺酸的含量测定，以期能价值，化学成分研究"]、呼吸耗氧墙等，而为各种石磺的科学利用及产品开发提供参考依对于石磺的牛磺酸含量分析未见报道。据和理论指导。牛磺酸(taurine)在贝类中的含量十分

6、丰富¨-20,22]，有抗心力衰竭、降血压和防治动脉粥收稿日期：2014—10—15基金项目：国家自然科学基金项目(41276157)；上海高校水产学一流学科建设项目资助作者简介：孙变娜(1990一)，女，硕士，主要从事海洋生物资源研究与开发。E．mail：sun1998521@126．tom通讯作者：沈和定，博士，教授。E—mail：hdshen@shou．edu．an；Tel：021—61900446海洋渔业2015年min后，经0．45m微孔滤膜过滤，立即进样2O1材料与方法，进行HPLC分析，测定其峰面积。1．1实验材料与仪器1

7、．2．4液相色谱条件材料：2013年5月～7月，采集瘤背石磺样色谱柱：AgilentZorbax300SB—C18(4．6mm品(上海崇明)、里氏拟石磺和平疣桑椹石磺(福×250mm，5m)；流动相：甲醇+乙腈+水(10：建厦门)以及紫色疣石磺样品(广东湛江)，对应10：80，v／v／v)；流速0．8mL·rain～；进样量：20凭证标本分别为(No．13LBSH)、(No．13L；荧光检测器(FLD)波长：Ex330nm，Em530LSNSH)、(No．13PYSHSH)、(No．13ZSYSH)，超nl'II；柱温30qC。低温(一

8、80oC)保存在上海海洋大学海洋贝类实1．2．5定量测定及数据分析验室。标准曲线：用0．02mg·mL标准使用液配试剂：牛磺酸标准品(Sigma产品)，邻苯二甲制成4．0、8．0、12．0、16．0、20．