复氧损伤的作用.pdf

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1、中国病理生理杂志ChineseJournalofPathophysiology2014，30(12)：2201-2205[文章编号]1000—4718(2014)12—2201．05ROS／PKC／p38MAPK途径在山茱萸多糖抑制心肌细胞缺氧／复氧损伤的作用木来丽娜，宋丽华，张晓京，张晓一，雷静文，刘芳，郭春花，宋晓亮(长治医学院药学系，山西长治046000)[摘要]目的：观察山茱萸多糖(polysaccharidefromFructuscorni，PFC)对缺复氧(hypoxia／reoxygenation

2、，}L／R)损伤心肌细胞的保护作用，并探讨其对ROS／PKC／p38MAPK途径的影响。方法：分离原代乳鼠心肌细胞，建立H／R模型，细胞分为7组：正常对照组(N组)、缺复氧组(H／R组)、缺氧／复氧+PFC(终浓度20ms／L、100ms／L和200msZL)预处理组、缺氧／复氧+PFC(100ms／L)预处理+蛋白激酶C特异性阻断剂chelerythrine(1i．Lmol／L)组及缺氧／复氧+PFC(100ms／L)预处理+p38MAPK特异性阻断剂SB203580(10I~mol／L)组。倒置显微镜下观察

3、细胞形态和自发搏动频率，Hoechst33258染色观察细胞凋亡率，酶标仪测定ROS含量、SOD活性及LDH漏出量，免疫印迹法检测PKC、p-p38MAPK和HSP70的蛋白水平。结果：H／R组细胞活力下降，搏动频率减慢，细胞ROS含量、LDH漏出量、细胞凋亡率及p-p38MAPK的水平均较N组显著增加(P<0．01)。经PFC预处理后，细胞搏动频率、SOD活性及PKC、HSP70的水平较H／R组显著增加(P<0．05，)，p-p38MAPK的水平和细胞凋亡率均减少(P<0．05)，而PFC的保护作用能被che

4、lerythrine或SB203580抑制。结论：山茱萸多糖可抑制心肌细胞缺氧／复氧损伤，其作用可能与增加SOD活性、抑制ROS产生、激活PKC并抑制p38MAPK的过度激活有关。[关键词】山茱萸；多糖；缺氧／复氧；心肌细胞；活性氧[中图分类号]R285．5[文献标志码]Adoi：10．3969／j．issn．1000-4718．2014．12．015RoleofROS／PKC／p38MAPKpathwayinprotectiveefectsofpolysac—charidefromFructuscornion

5、ratcardiomyocytesagainsthypoxia-reoxy·genationinjuryLAILi-na，SONGLi—hua，ZHANGXiao-jing，ZHANGXiao—yi，LEIJing—wen，LIUFang，GUOChun．hua．SONGXiao．1iang(DepartmentofPharmacology，ChangzhiMedicalCollege，Changzhi046000，China．E-mail：songxiaoliang62@sina．con)[ABSTRACT]

6、AIM：ToinvestigatetheeffectofpolysaccharidefromFructuscorni(PFC)oncardiomyoeytesagainsthypoxia／reoxygenation(H／R)injuryanditspossiblerelationshipwithROS／PKC／p38MAPKpathway．METHODS：Prima-ryeardiomyocyteswereisolatedfromneonatalSDratsandrandomlydividedintonorma

7、lgroup，H／Rgroup，PFC(20ms／L，100mLand200mg／L)preconditioning+H／Rgroups，chelerythrine+PFC(100ms／L)+I-I／RgroupandSB203580+PFC(100ms／L)+H／Rgroup．Thecellviabilitywasmeasuredbyinve~edmicroscopicobservation．Apoptosisinthecar-diomyocyteswasdetectedbyHoechst33258stain

8、ingandfluorescencemicroscopy．Thelevelsoflactatedehydmgenase(LDH)andsuperoxidedismutase(SOD)inthecellculturesupematants，andthereactiveoxygenspecies(ROS)inthecellswerealsomeasuredbymicroplatereade