内皮祖细胞对氧糖剥夺复氧损伤神经元的保护作用

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1、表兩扛ｆ硕击学位论文内皮祖细胞对氧糖剥夺／复氧损伤神经元的保护作用专业名称；影像巧学与核医学研究生姓名；李子惠导师姓名：居胜红教授（８。本论文获国家自然科学基金项目１３７１巧８）资助Ｐｒｏ化ｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｒｏｅｎｉｔｏｒｐｇｃｅｌｌｓｏｎｎｅｕｒｏｎｓａｆｔｅｒｏｘｅｎｌｕｃｏｓｅｙｇｇｄｅｐｒｉｖａ村ｏｎ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｅｄ化ＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｏｒｔｈｅＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｏ

2、ｆＭｅｄｉｃｉｎｅＢＹＬＩ－ｈｕＺｉｉＳｕｅｒｖｉｓｅｄｂｐｙＰｒｏｆ－ｈｏｎ．ＪＵＳｈｅｎｇｇＭｅｄｉｃａｌＳｃｈｏｏｌｏｆＳｏｕｔｈｅａ巧ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＡｒｉｌ２０１５ｐ东南大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研巧王作及取得的研究成果，，论文中不包含。尽我所知除了文中特别加Ｗ标注巧致谢的地方外其他人已经发表或撰写过的研巧成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同击对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。三。巧

3、、。ｓ＇、：如研究生签名：毒马％藥曰期东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研巧所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可Ｗ采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人一致，电子文档的内容和纸质论文的内容相。除在保密期内的保密论文外允许论文被查阅和借阁，可Ｗ公布（包括Ｗ电子信息形式刊登）论文的全部内容或中、英文摘要等部分内容。论文的公布（包括Ｗ电于信息形式刊登）授权东南大学研巧生院办理。ｏ．ｊｊ师签名曰期：三／ｒｔ广多口研巧生签名：克ｙ导．中文摘要中文摘要第一部分小鼠海马神经元原代培养及氧糖剥夺／复氧

4、损伤模型的建立ＣＸ－１目的利用缺氧培养室（ＡｎａｅｒｏＰａｃｋＰｏｕｃｈ３）物理缺氧Ｗ及培养基缺糖的方式建立小鼠海马神经元的氧糖剥夺／复氧（ｏｘｙｇｅｎａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ／＇ｒｅｏｘｅｒｆＵｓ，ｙｇｐｉｏｎ．ＯＧＤ／Ｒ）损伤模型，探索缺氧缺糖损伤及复氧的合适时ｉ哥一并观察复氧是否对缺氧缺糖损伤的神经元产生进步损伤。方法取新生Ｃ５７ＢＬ／６乳小鼠的海马原代培养神经元。神经元培养８ｄ后随机分为正常对照狙及模型组（ＯＧＤ／Ｒ组）。ＯＧＤ／Ｒ组缺氧缺糖设他、化、１２ｈＨ个时间点．复氧设化、２４ｈ两个时间点。将Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ

5、２７神涅元培养基替换成无＇糖Ｅａｒ，，然ｌｅｓ缓冲盐溶液并置于缺氧培养室中分别缺氧培养仙、化或１化后恢复到正常培养条件中化或２４ｈ，来建立ＯＧＤ／Ｒ组神经元氧糖剥夺／复氧损伤模型。采用ＭＴＴ比色法测定各组神经元细胞的存活率，并检测各組神经元培养（ｒ。液中乳酸脱氨酶ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｏｇｅｎａｓｅ，ＬＤＨ）的含量水平结果与正常神经元相比，，随着氧糖剥夺时间的延长其他各组神经元细胞存活（护００）４ｈ／率显著下降（ＰＯ．ＯＯｌ），同时培养基ＬＤＨ含量显著升高巧．１。ＯＧＤＲ２他组较ＯＧＤ４ｈ／ＲＯｈ组神经元细胞存活率显著减低，ＩＬＤＨ含量明显升高且差异均

6、戶＜１２有统计学意义（０．０）。〇ＧＤ４ｈ／Ｒ化组神皆元细胞存活率约巧．％％，为本实验较合适的ＯＧＤ／Ｒ模型。＇结论利用缺氧培养室物理缺氧Ｗ及无糖Ｅａｒｌｅｓ缓冲盐溶液可成功建立小鼠海马神经元氧糖剥夺，复氧可对缺氧缺糖４ｈ后的神经元产生／复氧损伤模型。同时一２化进步巧伤４ｈ／（ＯＧＤ４ｈ／Ｒ２化）模型。。建议本实验采用氧糖剥夺复氧＇ｌ，关键词海马神经元，缺氧培养室，无糖Ｅａｒｅｓ缓冲盐溶液氧糖剥夺／复氧Ｉ东南大学硕±学位论文第二部分内皮祖细胞对氧糖剥夺／复氧损伤神经元的保护作用目的研巧内皮祖细胞（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｃｅｌ

7、ｌｓ，ＥＰＣｓ）共培养对氧糖剥夺／复氧（ｏｘｙｇｅｎａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ，ＯＧＤ／Ｒ）损伤神经兀是否有保护作用。方法分离培养新生Ｃ５７ＢＬ化乳小鼠的海马神经元，利用缺氧培养室建立神经元ＯＧＤＣ５７ＢＬ／６小鼠的骨髓源性ＥＰＣｓ。／Ｒ模型。应用密度梯度离必法分离培养采用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室建立ＥＰＣｓ与ＯＧＤ／Ｒ损伤神经元的共培养